试验18分子筛凝胶层析.pptVIP

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试验18分子筛凝胶层析

一、实验目的 1、学习分子筛凝胶层析的原理 2、实践分子筛凝胶层析的过程 3、学习绘制样品分子筛凝胶层析的流出曲线 分子筛是一些多孔的介质,当含有不同大小的分子的混合物流经这一介质时,校分子物质都能进入介质内部空隙,而大分子物质被排阻在介质外,从而达到分离的目的 具有分子筛效应的常用介质有: 葡聚糖凝胶(Sephadex) 聚丙烯酰胺凝胶(Bio-Gel-P) 琼脂糖凝胶(Agarose) 葡聚糖凝胶 葡聚糖凝胶是交联葡聚糖(cross-1inked dextran),商品名为Sephadex,由水溶性的葡聚糖(Dextran)和环氧氯丙烷交联而成的三维空间网状结构物,两者的比例和反应条件决定其交联度的大小,即孔径大小(用G表示) 交联度越大、孔径越小。交联度或网孔大小又决定了凝胶的分级范围。 Sephadex G-25孔径较小常用来脱盐 三、实验步骤 1、凝胶的预处理 2、凝胶柱的选择 3、装柱、平衡 4、加样(典型样品蓝葡聚糖和维生素B12) 5、洗脱 6、洗脱液的检测 7、洗脱曲线的绘制 * * 分子筛凝胶层析 二、实验原理 *

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