RP-HPLC法测定妇乐颗粒中芍药苷含量.docVIP

RP-HPLC法测定妇乐颗粒中芍药苷含量摘要：目的：建立一种可测定妇乐颗粒中芍药苷的RP－HPLC方法。方法：采用Shim－pack VP－ODS色谱柱；流动相为乙腈－水(20:80)；检测波长为230nm。结果：芍药苷在1.008-504.0μgmL-1范围内呈良好的线性关系，(r=0.9998)，平均回收率(n=9)为101.7％；RSD 2.32％。结论：本法简便，可靠，准确，可用于该制剂的质量控制。 关键词：芍药苷：妇乐颗粒；高效液相色谱法 中图分类号：11285.5　文献标识码：A　文章编号：1673－7717(2007)09－1966－02 妇乐颗粒是由赤芍、牡丹皮、忍冬藤、延胡索、大血藤等中药组方制成的中药制剂，具有清热凉血、活血化瘀、消肿止痛功效，用于急性盆腔炎、急性附件炎、急性子宫内膜炎等引起的带下、腹痛等症。收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第18册，原标准对主要药味赤芍和牡丹皮中的芍药苷没有含量测定控制。本文采用高效液相色谱法测定妇乐颗粒中芍药苷，结果准确，操作方便，可用于该制剂的质量控制。经方法学研究，证明本法可行。现报道如下。 1　仪器与试药 日本岛津LC－2010 A高效液相色谱仪，自动进样系统；Lesolution Version 1.11 SPI色谱数据工作站；日本岛津UV－2450紫外分光光度计；KQ－250B型超声波清洗器(功率：250W，频率：40kHz)。乙腈、甲醇为色谱纯；水为重蒸溜水；芍药苷对照品由中国药品生物制品检定所提供，批号：110736－00423(供含量测定用)。妇乐颗粒(市售，批号G、200601021BGGMZ)。 2　色谱条件 色谱柱：Shim－pack VP－ODS(250mm×4.6mm，5μm)为色谱柱；乙腈－水(20:80)；检测波长为230hm；流速为1.0mL/min；柱温为40％；峰面积外标法定量。 3　方法与结果 3．1 供试品溶液的制备 3．1．1　样品溶液的制备　取本品适量，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理30min(功率：250W，频率：40kHz)，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 3．1．2　阴性空白对照溶液的制备　按其质量标准中的处方，制备缺味(赤芍、牡丹皮)中药的阴性空白样品对照液，照上述样品溶液的制备方法制成阴性空白对照溶液。 3．1．3　对照品溶液的制备　精密称取经五氧化二磷减压干燥24h的芍药苷对照品适量，甲醇溶解定容，制成每1mL含芍药苷约50μg的对照品溶液。 3．2 系统适用性试验 取芍药苷对照品溶液、阴性空白对照溶液和样品溶液，按上述色谱条件下进样10μL，得HPLC图谱。阴性空白对照溶液在芍药苷对照品出峰处域没有干扰峰出现，故样品中的其他组分对芍药苷测定无干扰作用。理论塔板数按芍药苷峰计算不应低于4000，分离度大于1.5，对称因子在0.95－1.05之间。 3．3　线性关系的考察 精密称取芍药苷对照品约10.08mg，置100mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置50mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为芍药苷对照品储备液。分别精密吸取对照品溶液0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、8.0、10、15、20、25、50μL，注入高效液相色谱仪，按上述条件测定，记录峰面积，以峰面积(Y)为纵坐标、芍药苷进样浓度(X)为横坐标进行线性回归，得回归方程：Y=6.4242×106×6.8328×103，r=0.9998。结果表明芍药苷的溶液在1.008－504.00μgmL-1之间呈良好的线性关系。 3．4　精密度试验 取同一批供试品溶液(批号G)，进样10μL，重复进样5次，测得：芍药苷峰面积的RSD为0.11％。再取芍药苷对照品溶液，重复进样5次，测得：芍药苷峰面积的RSD为0.06％。 3．5　重复性试验 取同一批号样品5份(批号G)，按3．1．1项下样品溶液的制备方法制备供试液，平行测定得：芍药苷的含量为1.0932mgg-1，RSD为1.51％(n=5)。说明方法重现性良好。 3．6　稳定性试验 取同一批号样品溶液(批号G，芍药苷含量为1.0932mgg-1)，在常温下放置12h，每间隔2h测定1次，连续共测定6次，得：芍药苷峰面积RSD为0.46％。表明样品溶液在12h内稳定性良好。 3．7