RP-HPLC测定阿奇霉素缓释阴道栓含量.docVIP

RP-HPLC测定阿奇霉素缓释阴道栓含量摘要：目的建立RP-HPLC测定阿奇霉素缓释阴道栓的含量。方法用cm(4.6 mm*150 mna，5um)柱，以乙腈.磷酸氢二钾溶液(0.02 mol／L)一磷酸二氢钾溶液(0.07 mol／L)溶液(60：25：15)为流动相，柱温40℃，流速l-2 mL／min，检测波长215 nm。结果阿奇霉素的线性范围为60～800ug／ml，r=0.999 8：低、中、高3种浓度的平均回收率分别为101.4％，99.1％，101.2％。结论本方法简便、灵敏、准确。 关键词：阿奇霉素：缓释阴道栓；RP-HPLC含量测定 中图分类号：R927.2 文献标识码：A 文章编号：1672-979X(2010)09-0328-03 阿奇霉素是新一代大环内酯类抗生素，其抗菌谱广，在酸性环境中稳定，具有吸收好、生物利用度高、半衰期长、组织及细胞浓度高、能向病灶定向转运、毒性低等优点。阿奇霉素是目前治疗非淋菌性尿道炎疗效确切的一线药物，其缓释栓用于阴道靶位给药，可克服口服给药胃肠刺激、肝脏首过作用及胃酸和消化液破坏药物等缺点，减少不良反应发生率。栓剂给药方便，疗效确切，对于治疗阴道的各种疾病具有独到的优势。本实验建立了RP-HPLC法测定阿奇霉素缓释阴道栓的含量，为阿奇霉素缓释阴道栓的质量控制提供依据。 1仪器与试药 高效液相色谱仪(日本岛津，LC.10Atvp输液泵，SPD.10Avp紫外检测器，DGV-14A色谱系统控制器，Shimadzu CLASS-VP色谱工作站)；分析天平(AB.104-N，上海梅特勒.托利多仪器公司)；S-3C型精密pH计(上海雷磁仪器厂) 阿奇霉素缓释阴道栓(60 mg／枚，本院自制，批：阿奇霉素标准品(中国药品生物制品检定所提供，批号130352-200304)；硬脂酸聚烃氧酯(S-40)(南京威雨化工公司，批号030312)；乙腈。甲醇(天津科密欧化学试剂开发中心，色谱纯)：其他试剂均为分析纯。 2方法与结果 2.1处方 阿奇霉素6 g，8％羟丙甲纤维素(HPMC)溶液23.52 g，羟苯乙酯0.59 g，甘油29.4 g，无水乙醇3 g，S-40 233 g。制成栓剂100枚，阿奇霉素含量60 mg做。 2.2制备工艺 称取HPMC 8 g于100 mL纯化水中，溶胀过夜，制成8％HPMC水溶液，备用。按处方量称取主药，过六号筛，加入羟苯乙酯、无水乙醇和甘油，搅拌溶解。称取处方量S-40，70℃水浴加热熔融后边搅拌边缓慢加入上述主药溶液，搅拌均匀，冷却至50℃。再逐滴加／k8％HPMC溶液，搅拌均匀，静置，除气泡，灌模、凝固、刮平，取出包装即可。 2.3含量测定 2.3.1色谱条件色谱柱：Shimadzu Shir-packvp Cls(4.6mm*150 mm，5 Ism)，检测波长215 nmm。流动相：乙腈-0.02 mol／L磷酸氢二钾溶液-0.07 mol／L磷酸二氢钾溶液(60：25：15)，柱温40℃，流速1.2 mL／min，进样量20 uL。 2.3.2溶液的制备 2.3.2.1对照品溶液精密称取阿奇霉素标准品25 mg置25 mL量瓶中，加pH 6.0磷酸盐缓冲液定容，摇匀，制得1mg／mL的溶液，备用。 2.3.2.2供试品溶液取自制栓剂1枚(含60 mg阿奇霉素)切碎，全部转移至25 mL量瓶中，加适量pH 6.0磷酸盐缓冲液，70℃水浴熔融，摇匀，冷却至室温，定容。过滤，取续滤液5 mL置50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得240 rtg／mL供试品溶液。 2.3.2.3空白溶液取空白栓1粒切碎，按供试品溶液制备方法制备空白溶液。 2.3.3系统适用性实验及专属性考察在本实验色谱条件下，分别取对照品溶液、供试品溶液、空白溶液各20uL进样，记录色谱图。按阿奇霉素峰计算，理论塔板数l 500，分离度1.5，保留时间f=12.4 min，空白基质无干扰。见图1。 2.3.4标准曲线的绘制配制浓度为60，120，200，300，400，600，800ug／mL的系列标准溶液，各取20UL进样，在215 nm测得峰面积A，得峰面积A与浓度c的线性回归方程：C=9.55×100-5.46(r=0.999 8，n=7)，阿奇霉素浓度在60～800ug／mL范围内与峰面积有良好的线性关系。 2.3.5精密度实验将120，300，600ug／mL3个浓度的对照品溶液重复进样6次，计算日内精密度；连续测5 d，计算日间精密度。结果日内精密度RSD分别为1.84％，1.49％，0.84％；日间精密度RSD分