螺原体超微形态的电镜研究 electron microscopic study of the ultramorphology of spiroplasma.pdfVIP

第30卷第6期 电 子 显微 学报 V01．30．No．6 2011年12月 of 2011—12 JournalChineseElectron MicroscopySociety 文章编号：1000—6281(2011)06—0547—05 螺原体超微形态的电镜研究 胡 冰1，贺子义1，李 霞2 (南京农业大学1．生命科学实验中心，2．农业部农业环境微生物工程重点开放实验室，江苏南京210095) meilliferum CH一1)在不同生长繁 摘要：应用透射电镜对从患“爬蜂病”的蜜蜂体内分离到的螺原体(Spiroplasma 殖时期的超微形态结构进行观察扣比较，并在低渗条件下对螺原体的细胞骨架结构进行研究。结果表明：螺原体 在四个不同的生长时期呈现不同的形态学特征，尤以在对数生长期形态最为多样，除典型的螺旋特征外，还有串 珠、出芽和分枝等结构，提示螺原体可能通过二分裂、多分裂、缢缩、出芽等多种方式繁殖。此外，本文在低渗条件 下观察到螺原体菌体胞质内的微丝和微管样细胞骨架结构，为进一步研究螺原体的运动模式提供了重要技术 途径。 关键词：螺原体；超微形态；繁殖方式；细胞骨架；电镜 文献标识码：A 中图分类号：Q934，3；Q336 螺原体(spiroplasma)是一类无细胞壁，可独立(1)取不同生长时期的螺原体CH-1菌液1 生活和自我复制的最简单的原核微生物。在液体 mL，8000r／min离心5rain，弃上清，用PBS洗涤3 mL 培养基中以旋转、扭动或伸缩的方式运动。1’…。螺 次，加入1 6％戊二醛，振荡后静置固定2h。用 原体由于没有细胞壁，不能维持固定的形态，表现 2％磷钨酸(PTA)，染色30S。 000 出丰富的形态多样性，但在生长到一定阶段均可呈 (2)取对数期的螺原体CH一1菌液1mL，8 现典型的螺旋形。3。。。螺原体细胞内部含有一可收 r／min离心5min，弃上清，加入2mL超纯水，振荡 缩的细胞骨架∽1，对于维持细胞形态和细胞内部结 后静置10min，用2％磷钨酸(PTA)，染色30S，电镜 构的有序性起着重要的作用，还与细胞内的胞质运 观察并拍片。 动、物质运输、分裂和分化等生命活动密切相关。7。。 1．3超薄切片制备 螺原体常作为研究细胞的形态、细胞骨架、细胞膜 取稳定期的螺原体CH一1菌液2mL，加入20倍 000 的功能及细胞分裂的模式生物。8“…。本文利用透 体积的6％戊二醛4℃固定8h，10 r／min离心5 射电子显微镜对从患“爬蜂病”的蜜蜂体内分离到 min，弃上清，用琼脂预包埋后切成1mm3小块，按 meilliferum 透射电镜常规制样方法制备超薄切片，电镜观察并 的螺原体(spiroplasmaCH一1)¨1。在不 同生长时期的超微形态结构进行比较，并在低渗条 拍照。 件下，对螺原体细胞骨架结构进行观察，为进一步 2结果与分析 研究螺原体形态多样性与其生长、繁殖、衰亡以及 运动之间的关系提供形态学依据。 2