生物：专题1《基因工程》-新人教版选修3.pptVIP

基因工程 提取目的基因的方法 人工基因合成法 三、将重组DNA导入受体细胞 基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌和动植物细胞等。 导入受体细胞常用的方法是借鉴细菌或者病毒侵染细胞的途径。通常还要对一些受体细胞进行增大通透性的处理。 目的基因可以随着受体细胞进行快速的繁殖，在很短的时间内获得大量的基因。 常用方法：利用标记基因(抗性基因)进行筛选 或DNA分子杂交技术 五、目的基因的表达 多细胞生物的检测，将每个受体细胞培养成个体，检测是否表现出特定的性状。 小 结 * 衢州三中 吴志明 步骤一 获得目的基因 利用PCR技术扩增 人工合成 已知序列： 从基因文库获得 未知序列： ( DNA library ) 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction) 逆转录法：以信使RNA为模板，在逆转录酶的作用下将脱氧核苷酸合成合成DNA(基因)。 直接合成法：根据蛋白质的氨基酸顺序推算出信使RNA核苷酸顺序，再据此推算出基因DNA的脱氧核苷酸顺序。用游离脱氧核苷酸直接合成相应的基因。 DNA合成仪 IMN 通过DNA合成仪用化学的方法直接人工合成 基因_____，核苷酸序列______ 。 较小 已知 ① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制_____________的核酸合成技术 ③条件：_______________________、 _______________、___________ (做启动子)、 ___________ ②原理：__________ ④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循 环的次数） ⑤结果： 聚合酶链式反应 体外 特定DNA片段 DNA复制 已知基因的核苷酸序列 四种脱氧核苷酸 一对引物 DNA聚合酶 指数 2n 使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增 利用PCR技术扩增目的基因： PCR扩增仪 IMN 6 过程： 变性、退火、延伸三步曲 变性 退火 延伸 质粒 DNA分子 限制酶处理 一个切口 两个黏性末端 两个切口 获得目的基因 DNA连接酶 重组DNA分子（重组质粒） 同一种 2.过程: 二、形成重组DNA分子 基因表达载体的组成： 重组DNA分子： 目的基因+目的基因自连 载体+载体自连 目的基因+载体连接 将目的基因导入受体细胞 将受体细胞进行扩增 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 农杆菌侵染法 基因枪法 植物病毒侵染法 ——显微注射法 ——用CaCI2处理 三、将重组DNA导入受体细胞 受体细胞 （四）筛选含有目的基因的受体细胞 前三步的处理十分繁锁，为保证目的基因得到有效利用，通常用大量的受体细胞来接受不多的目的基因。这样，处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。 依据重组质粒上带有的 标记基因 抗生素抗性基因 （抗四环素基因） 荧光蛋白基因 含四环素 完全培养基 检测菌落中是否有目的基因的表达产物。 如：转基因大肠杆菌是否产生了－－胰岛素原 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 如果是单个细胞－－检测是否产生 目的基因控制合成的产物 转基因抗虫棉 　　例：用棉花叶片喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。 *