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第三章 培养基 教学目标: 1.掌握培养基的种类及特点 2.掌握培养基的组成和适宜剂量 3.熟练掌握MS培养基配方 、配制及高压灭菌（重点） 4.了解生长调节物质的应用 1.培养基的种类及特点 1.1 培养基的发展简史 培养基的产生最早是Sacks(1860)和knop(1861)对绿色植物 的成分进行了分析研究，根据植物从土中主要是吸收无机盐 营养，而设计出了由无机盐组成的Sacks和knop溶液，至今有 的仍在利用作为基本的无机盐培养基得到广泛应用。以后根 据不同目的进行改良产生了多种培养基。 培养基 培养基(culture medium)：含有各种被培养生物材料所需要的营养成分的培养基质。 培养基是组织培养中最重要的基质，选择合适的培养基对培养成功与否关系很大。 培养基有各种种类，不同的植物和培养部位及不同的培养目的需选用不同的培养基。 培养基的名称，一直根据沿用的习惯。多数以发表人的名字来命名，再加上年号，如White(1943)培养基，Murashing和Skoog(1962)培养基。 基本培养基 根据培养基的无机盐成分和元素的浓度，可将培养基分为以下四类： 1. 富盐平衡培养基： MS培养基；LS培养基； BL培养基； BM培养基； ER培养基等。 2. 高硝态氮培养基： B5培养基；N6培养基；SH培养基等。 3. 中盐培养基： Miller培养基； H培养基； Nitsch培养基；Blaydes培养基。 4. 低盐培养基： White培养基；WS培养基；HE培养基；改良Nitsch培养基及HB培养基。 几种基本培养基及特点: MS培养基—富盐平衡培养基： ◆ 无机盐浓度较高（钾盐、铁盐、硝酸盐含量均较高），元素间比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲能力；微量元素种类齐全，浓度高；培养基营养丰富，在一般的培养中，无需额外加入复杂的有机成分。 ◆ 能加速愈伤组织和培养物生长. ◆ 广泛用于植物器官、花药、细胞及原生质体的培养。 Miller培养基—中盐培养基 ◆大量元素无机盐用量是MS的1/3－1/2 ；微量元素种类减少而含量增高，维生素种类比MS 多，如增加了生物素、叶酸；无肌醇。 ◆适合于大豆愈伤组织的培养和花药等培养。 几种基本培养基及特点 White培养基—低盐培养基 ◆ 无机盐量较低 ；有机成分含量相对也较低。 ◆ 适合生根培养、胚胎培养等． B5培养基—高硝态氮培养基 ◆ 含有较高的硝酸钾，较低的铵态氮和较高VB1； ◆较适合南洋杉、葡萄及豆科与十字花科植物等的培养。 SH培养基—高硝态氮培养基 ◆ 特点与B5相似，硫酸铵改用磷酸二氢铵。 ◆ 无机盐浓度较高。 几种基本培养基及特点: N6培养基：是我国学者创造（朱至清等，1975）获国家发明二等奖。 主要特点： ◆ 成分简单； ◆ 硝酸钾和硫酸铵含量高 ； ◆ 适合花粉、花药培养． KM-8P培养基： ◆ 有机成分复杂，包括了所有单糖和维生素，呼吸代谢中的主要有机酸； ◆ 主要用于原生质体培养(包括原生质融合的培养)。 2.1 水分 培养基大部分是水，配制培养基时一般用重蒸馏水，即蒸馏水再蒸馏 一次，使水中不含或少含某些离子，保证培养基中成分完全人为控制。 水的作用: 1.水是细胞原生质的主要组成成分； 2.水是重要代谢过程的反应物质和产物； 3.细胞分裂及伸长都需要水分； 4.水是植物物质吸收和运输及生化反应的良好溶剂； 5.水能使植物保持固有姿态，有利于光合作用和传粉； 6.调节植物体周围的温、湿度，维持植物体温稳定． 2.2 无机盐(inorganic element) 大量元素：N，P，K，Ca，Mg，S等元素。 以盐的形式加在培养基中，它们对植物细胞和组织的生长都是必不可少 的，需要量大于0.5mmol/L。其中特别说明的是：培养基中无机氮的供应可 以有两种形式，一种是硝酸盐；另一种是铵盐。 微量元素：Fe，Mn，Zn，B，Cu，Co，Na，I等。 对于植物细胞和组织的生长需要量小于0.5mmol/L，但必不可少，其中 Fe较为关键，以螯合形式提供，可使用FeSO4.7H2O和Na2-EDTA进行制备。 2.3.2 天然复合物 天然复合物的成分比较复杂，大多含氨基酸、激素、酶等一些复杂化合物。 它对细胞和组织