调节ALK5受体活化水平优化间充质干细胞的内皮分化及组织工程血管的应用.pdfVIP

第34卷 第2期 中山大学学报 (医学科学版) Ve1．34 No．2 2013年 3月 JOURNALOFSUNYAT-SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Mar． 20l3 调节ALK5受体活化水平优化问充质干细胞的内皮分化及 组织工程血管的应用 艾文佳 ，李 杰 ，李 雯 ，刘池拽 ，王深明 ，吕伟明 ¨ (中山大学附属第一医院 1．血管甲状腺外科 ，2．普通外科国家重点学科实验室，广东 广州 510080) 摘 要：【目的】目前干细胞分化内皮细胞(EC)用于血管治疗受限于分化率，既往研究提示转化生长因子131(TGF311) 参与内皮分化的调控。其作用因受体途径及分化阶段而不同。本实验即研究TGF311主要 I型受体 ALK5活化水平与间充质 干细胞(MSC)的内皮细胞分化效率间的关系及分化内皮细胞应用组织工程血管的研究。 【方法】采用差速贴壁及流式分选 获得大鼠骨髓 CD31一MSC，以含VEGF、bFGF及 EGM一2的培养基内皮诱导2周组作标准对照组 ，实验组为分阶段添加 TGF311活化 ALK5组 、SB431542抑制ALK5组 ；免疫荧光检测分化中内皮细胞标志蛋白vWF、KDR动态表达 ；诱导 14d后 通过流式细胞术分析各组 CD31+百分率比较诱导效率 。并检测诱导细胞体外血管形成功能，最后将分化的内皮细胞体外种 植于脱细胞基质血管表面构建组织工程血管。 【结果】基于KDR、vwF表达变化，间充质干细胞分化以第7天为界分为间充 质干细胞分化血管祖细胞及血管祖细胞分化内皮细胞两期。早期活化ALK5(vFT组)、后期抑制ALK5组(VFS组)其CD31 百分率分别为 (9．65+2．75)％、(2．28~0．20)％，较标准组提高7．7倍 (P=0．006)、1．8倍 (P=0．013)，差异具有统计学意义 ；诱导 细胞具有体外成血管功能并可应用组织工程血管内膜层重建。 【结论】ALK5受体途径在骨髓间充质干细胞分化内皮细胞中 呈阶段相关性 ：间充质干细胞分化血管祖细胞阶段活化 ALK5促进内皮分化，血管祖细胞分化内皮细胞阶段则抑制ALK5促 进内皮分化；提高内皮分化效率的细胞可应用组织工程血管内皮化。 关键词：ALK5受体；间充质干细胞；内皮分化 ；组织工程血管 中图分类号：R654 文献标志码：A 文章编号：1672—3554(2013)02—0207—08 e RegulationofALK5ReceptorSignalingPromotesDifferentiationofEndothelialCellsfrom MesenchymalStem CellsandItsApplicationtoTissueEngineeredBloodVessel AIWen-jia，LIJie，LIWen，LIUChi-zhuai，WANGShen—ming，LVWei—ming (1．DivisionofVascularSurgery，2．KeyLaboratoryofGeneralSurgery，TheFirstAffiliatedHospital，SunYat-senUniversity， Guangzhou510080，China) Abstract：【Objective】Currentlyendothelialcells(Ec)derivedfromstemcellsfortherapeuticvascularizationislimitedbylow— efficiency， studiesshowthattransforminggrowthfactor311 (TGF311) participatesintheregulationofdifferentiationofECbutis variantfordiversityofrecepto