22.12.常用特殊染色课件.pptVIP

常用特殊染色; 特殊染色是近代病理学研究工作和临床病理检验工作 不可忽视的重要手段. 一.胶原纤维:广泛分布于各脏器内,胶原纤维染色主要 用于和肌纤维鉴别.来源于间胚叶的肿瘤,如纤维瘤, 平滑肌瘤,横纹肌瘤,神经纤维瘤.甚至它们 的肉瘤都 产生一定的纤维.H.E染色难以区别.用胶原纤维染色 可以区别.慢性炎症 机化和瘢痕形成中出现胶原纤维, 通过胶原纤维染色可证实,如:慢性肾小球肾炎,大叶 性肺炎,良性高血压,小动脉玻璃样变等.; 1.Van Gieson 氏苦味酸-酸性品红染色法(V.G法) 试剂配制: ① weigert氏铁苏木素液 甲液: 苏木素 1 g 无水酒精 100 ml 乙液: 30%三氯化铁 4 ml 蒸馏水 100 ml 盐酸 1 ml 甲乙两液分瓶盛放,临用时两液等量混合. ; ②Van Gieson 氏染液 甲液: 1%酸性品红水溶液 酸性品红 1 g 蒸馏水 100ml 乙液: 苦味酸饱和水溶液(约1.2%) 甲乙两液分瓶盛放,临用时取甲液1份,乙液 9份混合使用 ③ 1%盐酸酒精液 70%酒精 99 ml 盐酸 1 ml ;操作方法: ①组织固定10%甲醛液,常规脱水包埋切片 ②切片脱蜡至水 ③ weigert氏铁苏木素液5-10分钟 ④流水稍洗 ⑤ 1%盐酸酒精迅速分化 ⑥流水冲洗数分钟 ⑦ Van Gieson 氏染液染1-5分钟 ⑧倾去染液,直接用95%酒精分化和脱水,吹干 ⑨中性树胶封闭 结果:胶原纤维呈鲜红色,肌纤维胞质及红细胞黄色 胞核蓝褐色;注意事项: ① weigert氏铁苏木素液因分甲乙两液 不宜 预先混合,否则易氧化沉淀而逐渐失去染色 力 ② Van Gieson 氏染液也甲乙两液分瓶盛放,临 用时取甲液1份,乙液9份混合,放置一段时 间后,酸性品红则不易着色 ③ V.G法染色容易褪色 ;; 2.Masson三色法 试剂配置: ① weigert氏铁苏木素液 ② 丽春红酸性品红液 丽春红 0.7g 酸性品红 0.3g 蒸馏水 99ml 冰醋酸 1 ml ③ 1%磷钼酸水溶液 磷钼酸1g加蒸馏水至 100ml ; ④2%苯胺蓝液 苯胺蓝 2g 冰醋酸 2ml 蒸馏水加至 100ml ⑤亮绿液 亮绿 1g 冰醋酸 1 ml 蒸馏水 99 ml ;操作方法: ①组织常规固定脱水包埋切片 ②切片脱蜡至水 ③ weigert氏铁苏木素液5-10分钟 ④流水稍洗 ⑤1%盐酸酒精迅速分化 ⑥流水冲洗数分钟封闭 ; ⑦丽春红酸性品红染液染5-10分钟 ⑧蒸馏水稍冲洗 ⑨ 1%磷钼酸水溶液 处理约5分钟 ⑩直接用苯胺蓝液或亮绿液染5分钟 ⑾1%冰醋酸处理1分钟 ⑿95%酒精脱水多次,吹干 ⒀中性树胶 染色结果:胶原纤维呈蓝色或绿色,肌纤维胞 质及红细胞红色,胞核蓝色. ; 注意事项: ① 本染色法组织最好用Bouin氏或Zenker氏 液固定为佳.如已用10%甲醛固定.切片脱 蜡至水后放入Bouin氏液作用一晚或至37 度温箱内1-2小时,流水冲洗切片至黄色 消失.再染色. ② 1%磷钼酸水溶液处理时可在镜下控制,见 肌纤维红色,胶原纤维呈淡红色即可 ; 附: Bouin氏固定液 饱和苦味酸水溶液 75 ml