2HPLC组成课件.pptVIP

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2HPLC组成课件

现代仪器分析 I;高效液相色谱仪的基本组成 高效液相色谱检测器类型 高效液相色谱固定相和流动相;Waters液相色谱仪;安捷伦液相色谱仪;岛津液相色谱仪;HPLC组成; 高压输液泵 输出压力高:150~350×105 Pa 流量稳定、范围宽,液缸容积小 具有压力平稳、脉冲小、密封性能好、耐腐蚀等特性; ;进样装置;进样过程;色谱柱;HPLC色谱柱填料;硅胶填料 机械强度好,高压下不易变形 填充床稳定 柱效高 反压低 柱寿命长 耐受pH范围窄pH2-8 表面呈现酸性,分离碱性化合物时拖尾 多孔聚合物 耐受pH范围宽pH1-13 在高pH分离碱性化合物峰形好 柱效低,柱床容易变形 其他无机填料 石墨碳 氧化铝 氧化锆 ;C18硅烷键合相;键合相类型 缓冲盐种类 有机溶剂性质 温度增加,pH降低,含水量提高加速水解;不同商品化的反相柱性质;;; 固定波长紫外吸收检测器: 低压汞灯提供固定254 nm或280 nm紫外光 可变多波长检测器: 氘灯做光源,光栅分光 光二极管阵列检测器(Photo Diode Array Detector,DAD) 钨灯和氘灯组合光源,进入检测池的不是单色光,而是 紫外光,可以辅助定性;光电二极管阵列光谱检测器;瞬间实时对流出液进行全光谱检测, 使LC能提供的信息量大幅度增加 一次色谱操作中, 可同时获得吸光值、流出时间和各组分的紫外-可见 光谱图在一起的三维谱图, 提供既定量又定性的色谱信号;示差折光检测器(Refractive Index Detector, RID) 原理:基于待测物质与流动相折射率的差异。当被测组分通过工作池时,由于折射率的改变,造成光束偏移,给出的光束能量小于或大于流动相通道。偏转角的大小与试样浓度成比例。 溶液的折射率等于溶剂及其中所含各组分溶质的折射率与其各自的摩 尔分数的乘积之和 (nsolution = ?Xi ni ) 特点: 通用型的检测器 灵敏度不高 不能用于梯度洗脱 对温度变化敏感; 1-钨丝灯光源 2-透镜 3-滤光片 4-遮光板 5-反射镜 6-透镜 7-工 作池 8-参比池 9-平面反射镜 10-平面细调透镜 11-棱镜 12-光电管;含对称共轭结构的有机芳环分子受紫外光激发能辐射出较长波长的荧光 高灵敏度, 高选择性 也可用于本身无荧光但可衍生化成荧光体等物质的检测;蒸发光散射质量检测器(Evaporative Light-Scatting Mass Detector, ELSD) ;?;继蓬墟炙炯婚特饺超葫炸乍刹割惯炕睦著饵断臃骏鲸统圭训琴斗乃奋沫搞2HPLC组成课件2HPLC组成课件;电导检测器(Electrical Conductivity Detector,ECD);液相色谱常用检测器;流动相

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