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不同计数法对乙肝患者白细胞检测影响作者单位：466000 河南省周口市中心医院? 通讯作者：吴树林 【摘要】 目的 探讨不同计数法对乙肝患者白细胞检测的影响。方法 对笔者所在医院50例慢性乙型重症肝炎患者（血清胆红素150～500 μmol/L），用血细胞分析仪计数和手工方法计数，对两种方法进行比较。结果 高胆红素血用血细胞分析仪计数与手工法计数差异有统计学意义（?P?＜0.001），高胆红素血能够使血细胞分析仪白细胞计数假性增高。结论 高胆红素血对血细胞分析仪计数结果有较大影响，应用手工方法复检。? 【关键词】 计数法； 乙肝； 白细胞? doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.06.050 ?? 黄疸是慢性重症肝炎的主要表现之一，主要是由肝细胞受损、坏死后摄取、转化、排泄胆红素的能力下降使得血液中的胆红素浓度升高所致。近年来，随着医学科学技术突飞猛进的发展，全自动血细胞分析仪已在全国广泛应用，这不仅提高了实验结果的精密性和准确性，而且也提高了工作人员的效率。但是，各类仪器仍有其不足之处，在日常工作中笔者发现，用血细胞分析仪对重症黄疸肝炎患者进行血常规测定时，部分患者白细胞假性增高，如果检验人员不进行下一步手工复查，会发出不准确的检验结果，严重影响临床医生对患者的治疗。本文探讨不同计数法对白细胞计数分类的影响。现报告如下。? 1 资料与方法 1.1 一般资料 50例重症乙型肝炎患者的血常规标本均来自笔者所在医院2011年1月～2011年6月感染科患者，其中男33例，女17例，年龄19 d～72岁，其中婴儿5例。经生化检验胆红素150～500 μmol/L。 1.2 仪器与试剂 深圳迈瑞公司生产的BC-5380五分类血细胞分析仪及配套试剂和质控；日本Olympus显微镜；血清胆红素检测使用罗氏MODULE P800生化分析仪及原装配套试剂。 1.3 方法 （1）血细胞分析仪检测方法：使用迈瑞BC-5380血细胞分析仪对50份标本进行检测，操作严格按生产厂商的操作手册进行。即取患者静脉血2.0 ml，置于?EDTA-?K2抗凝管内，充分颠倒混匀，1 h内上机检测。同种标本用相同仪器RRBC模式复检。（2）手工操作方法：严格按《全国临床检验操作规程》第2版进行??［1］?。即用已校正好的微量吸管吸取20 μl上述血样，放入0.38 ml WBC稀释液内，用改良牛鲍氏计数板显微镜计数。手工检测由于使用显微镜目测，能够排除红细胞及红细胞碎片的影响，此结果与有关研究［2,3］相符。体外标本去除高胆红素血浆后，不能导致仪器检测白细胞数的改变，此结果与有关研究［4］相符。 1.4 统计学处理 应用PEMS 3.1医学统计学软件对数据进行处理，数据采用单样本?t?检验，以?P?＜0.05为差异有统计学意义。? 2 结果? 50例重症黄疸肝炎患者的白细胞检测中，血细胞分析仪检测与手工操作方法检测的结果分别为（6.934±4.323）×10?9/L和（5.4±2.16）×10?9/L，差异有统计学意义（?t?=6.1264,?P?＜0.001）。? 3 讨论? 深圳迈瑞公司生产的BC-5380型全自动五分类血细胞分析仪采用半导体激光散射技术、细胞化学染色技术和先进的流式分析装置对白细胞、红细胞、血小板系列多个参数进行精确的计数和分类分析，是目前国内能生产五分类血细胞分析仪为数不多的厂家，具有快速、准确、稳定性好等优点。白细胞计数前会自动以溶血剂先将红细胞溶解，红细胞溶解后血细胞分析仪再计数白细胞池中颗粒数量，对白细胞是否有干扰取决于红细胞在溶血素作用后的破坏程度。正常人的红细胞加入溶血素后很容易溶解，肝病患者肝细胞受损后其摄取、转化、排泄游离胆红素的能力下降，从而使患者出现高胆红素血症。高胆红素能够使红细胞膜出现异常，使红细胞对溶血素具有一定的抵抗能力，使一部分溶血素被消耗而导致溶血素相对不足，红细胞不能够被完全破坏，未破坏的红细胞和碎片由于和淋巴细胞体积大小接近使血细胞分析仪误认其为白细胞，因此导致白细胞计数假性增高和白细胞分类不准确。同时，高胆红素能够和红细胞膜结合，血小板脂质结合形成大分子物质，血细胞分析仪检测时会把这些大分子物质和未破坏的红细胞记成淋巴细胞，从而使白细胞的总数明显高于手工计数，细胞分类时淋巴细胞假性增高，中性粒细胞相对减少。另外，标本的溶血不全可能会堵塞机器。? 生理性胆红素可以清除脂质过氧化物，能保持正常细胞膜脂质的流动性。但高浓度的胆红素容易形成稳定的胆红素自由基??［5］?，使多余的细胞膜脂不能被清除，细胞膜脂结合蛋白质后溶血剂也难以溶解，导致仪器在进行白细胞计数时出现误判，把未溶解的红细胞记成