RNA干扰于恶性肿瘤治疗.docVIP

RNA干扰于恶性肿瘤治疗RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指在进化中高度保守的、由双链RNA(double－stranded RNA，dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。它已在许多不同种属的生物体中被发现，并在生物体细胞之间进行传递，具有抵抗病毒人侵和维持基因组稳定的作用。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能及其他基因相关类研究中。近年来，RNAi技术更是被研究应用于治疗恶性肿瘤，并且取得了很好的成绩。 1　RNAi的作用机制 dsRNA(double－stranded RNA)可以介导基因沉默作用。dsRNA指的是大于30个碱基对的RNA分子。哺乳动物细胞有一条特异性路径竞争双链RNAfdsRNAl：特殊dsRNA的序列用于RNAi，起始阶段dsRNA被切成siRNA(small interfering RNA或short interfering RNAs)。siRNA是RNA干扰作用赖以发生的重要中间效应分子，能提供一定的信息，允许一个特定的mRNA被降解。 关于特异性的RNA作用机制模型．包括起始阶段和效应阶段。起始阶段dsRNA在Dicer酶(RNaseⅢ家族中特异识别双链RNA的一员，属内切核酸酶)的作用下加工裂解21～23核甘酸上的小分子干扰RNA片断(siRNA)。Dicer含有解旋酶活性以及dsRNA结合域和PAZ结构。在RNAi的效应阶段，siRNA双链结构解旋并形成有活性的蛋白／RNA复合物(RNA-induced silenc－ing complex or RISC)，在siRNA解双链即RISC激活过程需一个ATP。由RISC中siRNA反义链与mRNAX补区域结合，随后切割mRNA从而达到在RNA水平干扰基因表达。 2　RNAi在肿瘤治疗中的应用 恶性肿瘤是一种基因组的疾病，其特征是原癌基因的激活和抑癌基因的失活。还有凋亡相关基因的异常表达、部分自分泌生长因子和受体的过量表达也与细胞癌变有密切关系。RNAi由于其特有的优势而成为肿瘤基因治疗的新策略，针对肿瘤细胞特定靶基因的siRNA可抑制肿瘤、诱导凋亡、增强化疗或放疗的敏感性而发挥抗癌作用。研究表明，全身应用针对癌胚抗原相关细胞黏附分子的siRNA可以显著增加皮下携带移植胰腺癌细胞小鼠的成活率。Lvn激酶可以和BCRABL形成复合体。利用RNAi技术对Lvn激酶进行抑制。可以有效杀伤具有耐药性的慢性骨髓白血病细胞而不影响正常CD34细胞。MDR(multi－dmg resistance)是肿瘤化疗失败的主要原因，形成MDR的最常见的因素是肿瘤细胞MDR基因编码的糖蛋白过度表达。其中，MDRl对于细胞的多重耐药性起着重要的作用。Nieth等表明，特异siRNA可以抑制MDRl基因的表达。从而显著降低肿瘤细胞的耐药性。采用RNAi技术可特异地抑制癌基因、相关癌基因或突变基因的过度表达，使这些基因呈现沉默或休眠状态。从而达到肿瘤治疗的目的。Spankuch2Schmitt等利用RNAi技术对乳癌、宫颈癌和结肠癌等多种细胞系进行研究，发现肿瘤细胞增殖明显降低，而凋亡明显增加。Brummelkamp等利用逆转录病毒载体将siRNA导入肿瘤细胞中，特异性地抑制K2ras基因的表达．在急性髓细胞性白血病的实验治疗中也取得了满意的效果。Lin等利用RNAi技术诱导bcl22基因沉默，从而使前列腺癌细胞系的生长抑制，出现染色质浓集、基因组DNA断裂等细胞凋亡的特征。以上相关研究均证明，RNAi技术用于肿瘤的基因治疗是可行且有效的，不仅可抑制癌基因的表达，而且可使肿瘤增殖速度降低并可使肿瘤细胞的凋亡速度加快，提示RNAi技术在肿瘤的基因治疗方面具有良好的应用前景。 1