鸡胚源性毒株是埃及杂交肉鸡中传染性喉气管炎病毒爆发的根源.pdfVIP

总第13期/2014年2月 鸡胚源性毒株是埃及杂交肉鸡中 传染性喉气管炎病毒爆发的根源 Awad A. Shehata •Mohammad Y. Halami •Hesham H. Sultan •Alaa G. Abd El -Razik •Thomas W. Vahlenkamp 摘要：在埃及，尽管在鸡群中进行了疫苗接种，传染性喉气管炎病毒（ ILTV ）仍然持续引起呼吸系统的疾病。目前使用的 鸡传染性喉气管炎弱毒活疫苗提供了良好的免疫保护，但如果其广泛地在鸡群之间传播，也可能诱发潜伏感染甚至临床疾病。 我们从杂交肉鸡中分离到了四株传染性喉气管炎病毒野毒株，分别命名为ILT - Behera2007 、ILT - Giza2007 、 ILT - Behera2009 和ILT - Behera2010。根据气管内接种指数、气管损伤评分和鸡胚致死率指数得出的致病性分析显示， ILT - Behera2007 、 ILT - Behera2009 和 ILT - Behera2010分离株为高致病性毒株，而ILT - Giza2007则无致病性。系统发育 分析表明， ILT - Behera2007 ， ILTBehera2009 和 ILT - Behera2010为鸡胚源（CEO）疫苗相关株，而ILT - Giza2007 是一株组织源疫苗相关株。这些结果表明，鸡胚源喉气管炎疫苗病毒的毒力在鸡群中连续传代后可能会增强，从而造成易感 鸡群疾病的严重爆发。 背景 鸡传染性喉气管炎（ ILT ）是鸡的一种严重的呼吸系统疾病。急性型的特点是呼吸困难，咳出血液或血样粘液，眶窦 肿胀，发病率高达100 ％ ，死亡率差异较大，并引起蛋鸡产蛋量下降。传染性喉气管炎的慢性病例与其他呼吸道感染的症 状很类似。该疾病是由禽疱疹病 毒1型病毒 （GaHV -1 ）引起的，其属于疱疹病毒科，α疱疹病毒亚科，传染性喉气管炎 病毒属。ILTV的基因组为155 kb大小的线性双股DNA。在埃及，传染性喉气管炎首次报道于1982年，当时开罗和吉萨地区的 几个农场的蛋鸡出现了急性暴发，随后病毒迅速蔓延到邻近的其他地区 。重复的病毒分离和调查研究证明，蛋鸡和肉鸡群 中该病以临床和亚临床形式存在并广泛传播。在传染性喉气管炎的预防方面，组织源性 （TCO）和鸡胚源性 （CEO）改良活 疫苗均已商品化使用。大多数疫苗是有效的，但其中许多疫苗存在相当大的残留毒力，这种毒力可能会在动物传代过程中进 一步增强。与其他疱疹病毒一样，传染性喉气管炎病毒疫苗株和强毒株的感染可以在禽类的三叉神经节形成潜伏感染，尽管 在潜伏感染状态下很难检测到临床症状，这些病毒可以在鸡群中持续存在，并且可以在应激因素如产蛋开始或转群刺激下被 重新激活。毒力返强的疫苗株已造成了ILTV的多次爆发。本研究的目的是通过气管内接种指数（ITPI）、气管损伤评分（TLS） 和鸡胚致死率指数（MICE）来评估四株埃及杂交商品肉鸡中传染性喉气管炎病毒分离株的致病性，并与两株具有代表性的CEO 和TCO疫苗进行致病性和部分核苷酸序列的比较。 材料及方法 鸡群信息 在本研究中， 对布哈拉和吉萨地区2007-2010年期间的四个ILT疑似爆发病例进行了调查（表1）。很明显，大多数被调 查农场的卫生措施和生物安全都差强人意。在每个农场收集5-10只禽类的气管，进行汇总并且贴上标签，储存在-20℃直到 进行病毒分离处理。 通过鸡胚进行病毒分离 将每毫升中含1,000 IU青霉素和1毫克链霉素的PBS溶液 （PH值7.2 ）与气管匀浆液进行混合，通过绒毛尿囊膜途 径（ CAM ）接种到10日龄无特定病原体 （SPF ）鸡胚中。每天照蛋观察，并记录接种后7天内的胚胎死亡率。接种24 小时内的死亡被认为是非特异性的，将其丢弃，而在接种后2-7 天内死亡的鸡胚和7天后仍然存活的鸡胚，则进行了绒 毛尿囊膜痘斑病变检查。通过快速血凝试验 （HA ）检测了羊膜尿囊液（ AAFS ）中是否存在对10 ％鸡红细胞的凝集 作用。将存在痘斑的绒毛尿囊膜进行匀浆，3000rpm 离心15分钟，使用ILT抗血清和鸡腱鞘炎抗血清（Intervet B.V. Boxmeer, 荷兰）分别作为阳性和阴性血清，通过琼脂凝胶免疫扩散试验 （AGID ）进行检测。使用SPF鸡胚对鸡传染性 喉气管炎野毒株和疫苗株的最小感染量进行了检测，疫苗株包括商品化CEO鸡传染性喉气管炎活疫苗 （Intervet B.V. Boxmeer, 荷兰）和TCO疫苗（先灵葆雅动物保健）