hedgehog信号通路异常对人结肠腺癌多药耐药性的影响 - tumor - 肿瘤.pdfVIP

886 　　肿瘤2012 年11 月第32 卷第11 期　TUM OR Vol. 32, November 2012 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2012 .11.006 Copyright© 2012 by TUM OR Basic Research 基础研究 · Hedgehog信号通路异常对人结肠腺癌多药耐药性的影响 唐　阳，蔡松柏，张　旭，王松坡 上海交通大学附属第一人民医院中医科，上海　200080 [摘要]　目的：探讨Hedgehog （Hh ）信号通路与人结肠腺癌细胞多药耐药的关系。方法：以结肠腺癌敏感细 胞株HCT-8 和多药耐药细胞株HCT-8/VCR 为研究对象，采用Hh 信号通路激动剂SAG 及抑制剂GANT61 进行干预。实验分为4 组：HCT-8 组、HCT-8/VCR 组、HCT-8 ＋SAG 组 （3 nmol/L SAG 干预48 h ）以及 HCT-8/VCR ＋GANT61 组 （5 μmol/L GANT61 干预48 h ）。采用CCK-8 （cell counting kit-8 ）法检测细胞耐药 性及存活率。实时荧光定量PCR 和蛋白质印迹法分别从基因和蛋白水平检测P- 糖蛋白 （P-glycoprotein ，P-gp ） 及Hedgehog 信号通路相关蛋白Smo 和Gli1 的表达。结果：HCT-8/VCR 组Smo 、Gli 1 和P -gp 基因及蛋白表达 高于HCT-8 组 （P ＜0.05 ）；HCT-8 ＋SAG 组24 和48 h 时的细胞存活率及Smo 、Gli 1、P -gp 基因和蛋白表达 水平均高于HCT-8 组 （ P ＜0.05 ）；HCT-8/VCR ＋GANT61 组24 和48 h 时的细胞存活率及Smo 、Gli1 、P -gp 基因和蛋白表达均低于HCT-8/VCR（P ＜0.05 ）。结论：人结肠腺癌细胞多药耐药性与Hh 信号通路异常激活有关。 [关键词]　结肠肿瘤；抗药性，肿瘤；信号转导；猬蛋白质类；P 糖蛋白 [中图分类号]　R735.3+5 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2012) 11-0886-06 Effect of abnormal Hedgehog signaling pathway on multidrug resistance of human colon adenocarcinoma cells TANG Yang, CAI Song-bai, ZHANG Xu, WANG Song-po Department of Traditional Chinese Medicine, Shanghai First People’s Hospital, Shanghai Jiaotong University School of Medicine, Shanghai 200080, China [A BSTRACT]　Objective: To investigate the correlation between Hedgehog (Hh) signaling pathway and multidrug resistance of human colon adenocarcinoma cells. Methods: Human colon adenocarcinoma cell line HCT-8 and its vincristine (VCR)-resistant variant HCT-8/VCR cells were treated by agonist SAG or antagonist GANT61 of Hh signaling pathway, respectively. Four groups were designed for the purpose