早期胚胎培养 课.pptVIP

阅读P69~71思考以下问题： 卵子的采集有哪些方法？ 精子的采集有哪些方法？ 体外受精需要哪些前处理？ 保存剩余的卵子和精子的方法是什么？ * * * * 1978年7月25日世界首例试管婴儿 1988年3月10日我国首例试管婴儿 1992年我国首例三胞胎试管婴儿 据资料回答： 1.资料上用到了哪些生物技术？ 试管婴儿技术（包括体外受精、胚胎体外培养）和胚胎移植技术。 2.试管婴儿和母亲正常怀孕，生产的过程有何异同？ 相同：有性生殖,母体子宫发育成胎儿 不同：体外受精，体外发育成早期胚胎， 胚胎移植 试管动物技术： 通过 使卵子和精子在 下成熟和受精，并通过培养发育成 后，再经移植产生后代的技术。 体外条件 人工操作 早期胚胎 快速繁殖动物优良品种 目的： 技术： 体外受精和早期胚胎培养 胚胎移植技术 国产奶牛：年均产奶量3000公斤左右 国际良种奶牛：年均产奶量10000公斤左右 引进一头良种成年奶牛需要3万－5万元； 牛的生育率低，一头牛一胎只生一只，一生只能生育四五次。 牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右； 公牛产生的精子数目就更多了。 一、从试管牛说起 试管动物技术过程： 第一步：体外受精 第二步：胚胎的早期培养 第三步：胚胎移植 主要包括 、 和 等几个主要步骤 。 概念：采取雌性动物的 和雄性动物的 ，使其在 中受精。 注：发育的主要场所是母体子宫 二、体外受精 卵细胞 精子 试管 卵细胞的采集 精子的获取 受精 一、体外受精 1、卵母细胞的采集和培养 采集方法： ①促性腺激素处理，输卵管冲卵子 （小型动物，如鼠、兔、羊等） ②直接从卵巢中采集卵母细胞。 （大型动物，如牛） 采集的卵母细胞，都要体外人工培养成熟（MⅡ中期）后，才能与精子结合受精。 （屠宰的卵巢取卵；活体取卵） 大型动物，如牛： 从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞，也可以借助 、 或 等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工培养，使其成熟。 卵巢 超声波(B超)探测仪 内窥镜 腹腔镜 牛卵巢 B超活采仪 B超引导法： 借助超声波探头和屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过进入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。 检查卵母细胞 活体采集的牛卵母细胞 卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱 CO2培养箱模拟生物环境(PH), 保证卵母细胞成活发育 培养箱 2.精子的收集和获能 收集精子的方法： 假阴道法 手握法 电刺激法 2. 精子的收集和获能 1)收集的方法: 假阴道法、手握法和电刺激等 2)获能方法: 培养法：精子放入获能液培养 （啮齿动物、家兔和猪） 化学诱导法：精子放入适宜浓度肝素 或钙离子载体A23187溶液诱导 （牛、羊等家畜） 3.受精 获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在 或 中完成受精。 获能溶液 专用受精溶液 离心的目的是什么？ 将精子从精液中分离出来，提高精子浓度 三、胚胎的早期培养 发育培养液：水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 牛、羊：桑椹胚或囊胚 小鼠、家兔：卵裂期 试管婴儿：8个或16个细胞 胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。 不同动物胚胎移植时间不同 注：胚胎发育的主要场所是母体 * *