奶牛乳汁中细菌的分离鉴定与药物敏感性试验.pdfVIP

畜牧与兽医 2008年 第40卷 第8期 奶牛乳汁中细菌的分离鉴定与药物敏感性试验 袁 橙，赵彦华，邵 靓，林 华，任建鸾 (南京农业大学动物医学院，江苏南京 210095) 摘要 ：对南京市某奶牛场19头奶牛抽取乳汁进行细菌分离鉴定。其中，健康奶牛9头，患显性乳房炎奶牛6头，患隐性乳房炎奶牛4头。共分 离鉴定出蜡状芽胞杆菌 1株、克雷伯菌属细菌 1株、肠杆菌属细菌2株、葡萄球菌属细菌 12株。对分离出的16株细菌采用药敏纸片法进行常用 抗生素的药物敏感性试验。结果表明，分离菌中的蜡状芽孢杆菌对庆大霉素、氯霉素、复方新诺明、呋喃妥因、链霉素和红霉素均较为敏感，克 雷伯菌仅对氯霉素较敏感，肠杆菌仅对庆大霉素敏感，葡萄球菌则对青霉素、氯霉素、红霉素较为敏感。 关键词：奶牛；乳汁；细菌；分离鉴定；药敏试验 中图分类号：$858．23 文献标识码：A 文章编号：0529-5130(2008)08-0071—03 牛乳含有丰富的蛋白质、脂肪、糖、维生素和矿 培养基、麦康凯培养基、THB培养基、普通肉汤培 物质等多种营养要素，且具有保健强身、防病治病、 养基及蛋白胨水、葡萄糖蛋白胨水等试剂。按照实验 抗衰老等诸多功能性食 品的优 良特性 。近年来 ， 室常用配方配制革兰氏染色液。所用的细菌微量生化 人们对乳制品的需求量 日益增长，同时对乳质的要求 反应管由杭州天和微生物试剂有限公司生产。 也愈来愈严格。要生产出高品质的鲜奶产品，就必须 1．3 药品 有高质量的原料奶 J。但牛乳中可能含有的微生物 采用杭州天和微生物试剂有限公司生产的青霉 多达数十种，这些微生物中的多种细菌不但影响人类 素、庆大霉素、氯霉素、呋喃妥因、复方新诺明、红 健康，还会引起奶牛乳房炎，导致奶牛产奶量降低、 霉素、链霉素等药敏纸片。 牛乳品质下降等，给奶牛业造成巨大的经济损失 。 1．4 细菌的分离与染色 本文从南京市麒麟镇某奶牛场采集乳样，对乳汁中的 将 19份乳样接种至普通琼脂培养基、麦康凯培 细菌进行了分离纯化培养，根据细菌的培养特性、镜 养基和THB培养基，置于37c(=恒温培养箱中培养 检形态和生化试验结果对分离菌的种类进行初步判 24h。细菌长出后，排除酵母菌和霉菌等，挑取各型 定，并通过药物敏感性试验，筛选出对分离菌有较高 菌落接种至普通琼脂培养基、麦康凯培养基和THB 敏感性的药物，以期为奶牛场的消毒、奶牛乳房炎的 培养基以分离纯化，置37℃恒温培养箱中培养24h， 防治和牛乳的加工工艺提供一定的参考。 观察菌落 的形态。挑取单菌落进行革兰氏染色， 镜检。 1 材料与方法 将分离纯化的细菌接种至普通肉汤培养基，置于 1．1 奶样采集 37℃恒温摇床培养24h，观察细菌生长特性。进行 用CMT诊断液对牛场奶牛进行检测后，随机抽 革兰氏染色，镜检。 取健康奶牛9头、显性乳房炎奶牛6头、隐性乳房炎 1．5 生化鉴定试验 奶牛4头进行奶样采集。采样前将牛尾固定在体侧， 将分离纯化的细菌分别接种予葡萄糖、麦芽糖、 用毛刷刷去其后躯和乳区皮肤粘附的污物，用温水将 乳糖、蔗糖、甘露醇、Hs、枸橼酸盐、尿素微量生 乳房擦洗干净后，以0．2％的新洁尔灭和75％的酒精 化管及蛋 白胨水、葡萄糖蛋 白胨水中，置 37℃恒温 消毒乳头，然后戴上消毒手套进行人工挤乳。弃去头 培养箱中培养24～48h，观察结果。 3股乳汁，将第4股乳用无菌冻存管接住。采集乳汁 1．6 药物敏感性试验 约3～4mL后，迅