两种25-羟基维生素D测定方法的评价.pdfVIP

齐齐哈尔医学院学报 2013年第34卷第 14期 JournalofQiqiharUniversityofMedicine．2013．v01．34，No．14 · 2101 · ． 技 术 ·方 法 ． 两种 25一羟基维生素 D测定方法的评价 冯海英 王颖 林丽荣 孙要武 李继媛 金佰明 邢丽莎 宫正 维生素D不仅调节体内的钙磷代谢 ，而且有多种生物学 液相色谱(HPLC)，但是 HPLC所需样品量大、灵敏度低 ，并且 作用。近年来，维生素D缺乏与肿瘤 、I型糖尿病、类风湿性 需时较长，不适合临床应用。液相色谱 一串联质谱法 (LC— 关节炎等疾病的关系受到广泛关注 ，维生素 D营养状况 MS／MS)是色谱法检测25-(OH)D中最为常用的方法。国内 评价指标和方法也有了新的发展，但是 目前仍然公认血清25一 外均有 LC．MS／MS测定25．(OH)D的报道，样品前处理可采 (OH)D检测是最佳指标。根据测定原理的不同，25一(OH)D 用固相萃取或液一液萃取技术。该方法具有简单快速、灵敏 的分析方法有酶联免疫法(ELASA)、放射免疫法(RIA)、色谱 度高、回收率好、特异性高的优势，被大家公认为是评价维生 法等。 素D的 “金标准”测定法 J。由于LC．MS／MS的仪器昂贵、技 一 、 酶联免疫法 术复杂，目前还难以普遍应用于临床常规检测。但是，相对而 ELISA法是使受检标本和酶标抗原或抗体与包被了抗原 言，该方法的长期运行成本较低 ，通过开发检测试剂盒，将有 或抗体的固相载体反应生成抗原抗体复合物，洗去其他杂质 助于简化 LC．MS／MS法检测流程和推广普及。 及未被结合的抗原或抗体，最后根据酶催化底物生成的有色 ELISA法与LC．MS／MS法是 目前临床常用的检测方法， 产物颜色的深浅进行定性或定量分析。酶的催化效率高，可 基于测试原理的不同，两种方法检测25．(OH)D的结果存在 极大地放大反应的效果，因此该测定方法的灵敏度很高。25一 一 定的差异。随着维生素 D生物学功能的深入研究，临床上 (OH)D在血液中比较稳定，生物半衰期约为3W，且25-(OH) 对25-(OH)D的测试需求必将越来越大 ，但是 目前 尚无 25一 D 占95％，所以常用 ELISA法评价体内维生素D的水平 。 (OH)D测定的统一标准，应该尽快建立检测的标准程序，改 ELISA法是早期维生素D测定的主流方法，并且易实现 自动 进25一(OH)D测定结果的实验室间可比性。 化操作、节省人力 ，适用于实验室开展临床常规检测。由于凡 是维生素D羟基化合物都可能发生抗原一抗体结合反应，所 参 考 文 献 以该法只能用于检测25．(OH)D总的含量，而不能同时检测 11lMattilaC，KnektP，Mannistos，eta1．Serum 25一hydmxyvitamin concentrationandsubsequentriskoftype2diabetes．DiabetesCare， 25一(OH)D2和25一(OH)D3的含量。当受试者服用维生素D2 2007．30：2569-2570． 时，ELISA法测定结果偏低，可能造成临床决策的失误 ，使维 [2] 吴美华，魏群．维生素 D、维生素D受体与高血压．中华高血压 生素 D中毒的风险增大 J。ELISA法另一不足之处是对基 杂志，2008，1：92-94． 质效应敏感 ，可