适冷海洋细菌交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)MB-1内切葡聚糖酶基因的克隆和表达.pdfVIP

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2017-07-28 发布于江苏
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适冷海洋细菌交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)MB-1内切葡聚糖酶基因的克隆和表达.pdf

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卷期 ! # 微生物学报 ’( )! 1’ ) # 年月 $%% $ !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,-./-0 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 适冷海洋细菌交替假单胞菌（） ./012($*#0’(3(-$/ ! # $%’ 内切葡聚糖酶基因的克隆和表达游银伟汪天虹（山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室济南 $%#%% ）摘要：从黄海深海海底淤泥中筛选出一株产纤维素酶的适冷革兰氏阴性杆菌GH5#，克隆和分析了GH5# 的#4I 序列（接受号：），经鉴定为交替假单胞菌（），命名为 -J1K L+BH/BM KN#6$# !#$%’()#*+,’ !#$%’()#*+,’ ?O ) GH5#。克隆了该菌适冷内切葡聚糖酶基因（接受号：），并在大肠杆菌（）中 -#(. L+BH/BM KN#6$$ /-0#*1-01’ -(1 HP$# 进行了表达。重组 / ) -(1 菌体破碎后，获取上清液，其中融合蛋白LI25Q+(K 浓度约为D3 F8RS P。分析了融合酶的性质，其最适反应温度为，最适反应值为，为中性适冷酶。实验结果为交替假单胞菌低温纤 LI25Q+(K 6T OU D F$ 维素酶的基础理论和应用研究奠定了基础。关键词：海洋适冷酶，交替假单胞菌，内切葡聚糖酶，融合蛋白表达中图分类号：文献标识码：文章编号：（） VD34 K %%%#54$%C $%% %#5%#!$5%6 ［］ # 交替假单胞菌属（）是年根据；： !#$%’()#*+,’ #CC LK2QQKLKL222LK2QQ2LLQ2QKL56] [$ ]5QLLLK2QQ2KQL 序列的特点从交替单胞菌属（）中分离出 LQ2KQQ22L22KQLKQ256]。反应体系（）：， #4I -J1K .()#*+,’ % P #% ^ ,.+- P # # 来的一个新属，目前已知的交替假单胞菌都是从海洋和湖泊模板，，酶，引物和各