新型pcr技术 - 兰州大学.pdfVIP

第43 卷 第1期 兰州大学学报（医学版） Vol.43 No. 1 2017 年2 月 Journal of Lanzhou University （Medical Sciences ） Feb. 2017 文章编号：1000-2812 (2017) 01-0060-06 新型PCR 技术 闫 雯，尤崇革 兰州大学第二医院 检验一科，甘肃省消化系肿瘤重点实验室 甘肃 兰州 730030 摘要：聚合酶链式反应 （PCR ）是一种选择性DNA 快速扩增技术，常用于基因检测与分子诊断。作为分子生物学的关 键技术，其发展经历了终点PCR 、实时PCR 和数字PCR 三个阶段，实现了定性检测到绝对定量的转变。面对高GC 模板 和稀有突变的扩增难题，以及快速、高效和经济的特殊需求，诞生了极限PCR 、光PCR 、Cast PCR 和脉冲PCR 等多种 新型PCR 技术。 关键词：聚合酶链式反应；极限PCR ；光PCR ；Cast PCR ；脉冲PCR 中图分类号：R453.9 文献标识码：A doi ：10.13885/j.issn. 1000-2812.2017.01.012 New PCR Technologies Yan Wen, You Chong-ge First Department of Clinical Laboratory, Key Laboratory of Digestive System Tumors of Gansu Province, Second Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 730000, China Abstract ：：Polymerase chain reaction (PCR) is essentially a selective DNA amplification technique commonly applied for genetic testing and molecular diagnosis because of its high specificity and sensitivity. As a key technology in molecular biology, PCR has gone through the three stages of end-point PCR, real-time PCR and digital PCR, and achieved the leap from qualitative detection to absolute quantification. In practice, for the problems of amplifications of GC- rich templates and rare mutations, and the specific requirements of the rapid, efficient and economic, many new PCR techniques, such as HPE-PCR, Cast PCR, extreme PCR and photonic PCR, have come into being. In this article, the basic principles and applications of these PCR tech- niques were reviewed. Keywords: polymerase chain reaction; extreme PCR; photonic PCR; cast PCR; heat pulse extension-PCR 聚合酶链式反应 （polymerase chain reaction ， 聚合酶的诞生，终点 （End-point ）PCR[1]技术得到 PCR ）是一种基因扩增技术，其反应过程包括变 推广，但其产物需通过琼脂糖凝胶电泳进行检 性、退火和延伸三个步骤：双链DNA 在高温条件 测，极易发生污染。1996年，为进一步定量基因 下变性解链，与互补引物退火，在DNA 聚合酶作 组DNA 的初始浓度，诞生了实时PCR 技术，即 用下，引物链按照碱基互补配对原则延伸，合成 在PCR 反应体系中加入荧光染料或荧光探针，于