DNA的损伤和修复题库.pptVIP

Immediate methylation of the A in GATC of the parental strand but not of the daughter strand right after replication Expensive to keep the accuracy * SOS修复酶只有在细胞受到损伤时才存在（正常细胞中不存在）， 机制－－a、SOS系统以某种方式对polⅢ进行修饰（改变校对亚基功能）b、由polⅡ负责超越创伤 复制结果大量的没有被错配修复系统和切除修复系统纠正的错误碱基导致突变－－错误倾向性－－－－存活下来总比死亡好 * 细菌在UV、丝裂霉素C、烷化剂等作用下造成DNA的损伤，抑制DNA的复制－－－－此时细胞产生一系列的表型变化－－－对损伤DNA修复能力迅速增强、诱变率的提高、细胞分裂停止以及λ原噬菌体的释放－－－－－统称为SOS反应 LexA protein represses many genes, including repair functions, recA and lexA,. Activation of RecA leads to proteolytic cleavage of LexA and induces all of these genes. UV引起DNA损伤的Signal－－－ (S.S. DNA tail or 5Nt S.S.DNA) * * SOS repair 是一种error-prone 极强的修复机制 * * DNA糖苷酶识别切除改变的碱基 核酸内切酶切除磷酸二酯键 DNA聚合酶Ⅰ填补 DNA连接酶连接 * 2.识别的酶： （1）一类DNA糖苷酶，各具特异性 e.g.尿嘧啶DNA糖苷酶—识别DNA中的U （由C突变而来） （2）作用： 识别-----DNA中改变的碱基 水解-----受损的碱基与脱氧核糖间的糖苷键 使受损的碱基脱落 * * E．coli的核苷酸切除修复机理。 在E．coli中，UvrA，UvrB，UvrC三种蛋白必须同时存在才能发挥作用，所以也叫UvrABC切除核酸酶。 UvrA是一种腺苷三磷酸酶，是损伤识别蛋白。它与UvrB 结合成A2B1复合物，结合在损伤区，使DNA解旋、扭曲，并引起UvrB构象改变，与损伤部位形成紧密的结合。 然后UvrA与UvrB—DNA复合物解离，后者成为UvrC特异结合靶。 UvrB 在损伤的3’侧作一内切，随而复合物构象改变， UvrC 得以在5’侧作第二个切口。 解旋酶 Ⅱ(UvrD)使寡聚核苷酸片段及UvrC从DNA链上释放，然后DNA聚合酶Ⅰ取代UvrB。修补缺损区；最后由连接酶连接补片。 2）. 核苷酸切除 * * * 当DNA双链发生严重损伤时需要另一种机理来完成正确的修复。 一种情况是两条链同时受到损伤；另一种情况是单链损伤尚未修复时发生了复制，造成对应于损伤位置的新链缺乏正确模板；此时需要重组酶系将另一段未受损伤的双链DNA移到损伤位置附近，提供正确的模板，进行重组。这便是重组修复。 （三） 重组修复 * 重组修复 (链转移修复) 复制后修复 容易出错 RecA, DNApolymerae ligase 二聚体后起始 RecA 聚合酶、连接酶 重组修复后的损伤位点可 由其它机制进一步修复 * DNA mismatch + ----- A----- - ------C--- DNApol (ξ= 10-8) 经第二次校正ξ= 10-11 错配修复系统(MRS Mismatch Repair System) 错配修复:碱基切除修复的一种特殊形式. 使复制的保真性提高102～103倍 （四）、错配修复 * 错配修复系统（Mismatch repair system） DNA polymerase Helicase SSB 外切核酸酶 (Ⅰ和Ⅶ) 连接酶 MCE (mismatch correct enzyme) 3 subunits mutH, L, S 扫描新生链中错配碱基 识别新生链中非 m6A 的GATC序列 酶切含错配碱基的新生DNA区段 （1）组成 * ★ DNA合成过程中的甲基化变化 DNA中的GATC(palindromic seq.) 为m6A甲基化敏感位点 平均每2kb左右有一GATC seq. 错配修复系统受甲基化的引导 * 甲基化程度的差异 a、MutH/MutS 扫描识别错配 碱基和邻近的GAT