固相萃取-芯片毛细管电泳分离分析系统的分析.pdfVIP

摘 要 本文以核黄素及其代谢物为模型化合物，研究建』：‘7固相萃取在线联刚的芯 片毛细管电泳激光诱导荧光分离分析系统。 在第一章中，介绍了目前有关固相萃取和芯片联用的研究进展，对文献中各 种不同的联用技术进行了综述，讨论了各种联用方法的优势和缺陷。 在第二章巾，研究建立芯片毛细管电泳一激光诱导荧光(CCE-LIF)分离分析 核黄素和黄素单核苷酸的方法。首先介绍了核黄素和黄素单核苷酸的生化特性和 在生物体内的功能，然后考察并优化了影响分离分析的各种实验参数，在 pH=7．00的5．0mm01几的磷酸缓冲液中，选择2500V分离电压，可在1分钟左 右使两组分达到完全分离。最后，将所建立的方法应用于黄素单核苷酸钠合成占占 中的核黄素杂质的检测，合成品中的核黄索杂质含量约为3％左右，符合产品规 格。 第三章是关于顺序注射固相萃取预浓集与芯片毛细管区带电泳的联用 (S1 SPE—CZE)的基础研究。以核黄素为模型分析物，对各种可能影响同相萃取 和芯片毛细管电泳的实验参数进行了考察和优化。最佳实验条件为：用80％甲 醇+5．0 mmol／L磷酸溶液(pH=6．00)的混合溶液作为洗脱剂；5．0mmol儿磷 酸溶液(pH=8．00)作为芯片毛细管电泳缓冲液；选择固相萃取上柱流速l：{．3 ¨L／s、洗脱流速20gL／s：进样电压1000V。联用体系能基本稳定地工作，最 高富集倍率12．6倍，对核黄素的最低检测限是0．1 pmol／L。同时，文巾还对实 验过程中遇到的问题及体系存在的缺陷进行了探讨。 关键词： 微流控玻璃芯片； 毛细管电泳； 激光诱导荧光检测： 顺序注射 固相萃取； 核黄素； 黄素单核苷酸 Abstract asmodel work riboflavinandravinmononucleotideanalytes，the Using present studiesonlinecombinationof extraction(SPE)withmicrochipcapillary solid—phase electrophoresis(CE)． Inthefirst recent ofthe extraction solid—phase coupled chapter,thedevelopment tO was combinationwasintroduced．Their microchipreviewed．Diversitytechnique and werediscussed， advantagesdisadvantages Inthesecond withlaseinduced chapter,amicrochipcapillaryelectrophoresis fluorescence constructedfor anddetectionof detector(CE—L1F)wasseparation riboflavinandflavinmononucleotide．Thechemicalandbiochemicalof properties riboflavinandflavin andtheirfunctionin were mononucleotide