2016化学检验工技能培训与考核（中级）【高教版】教案：分光光度法模块.docVIP

化学检验工技能培训与考核（中级） 分光光度法模块之 任务一 邻二氮菲分光光度法测定微量铁 教学任务： 学会使用分光光度计； 学会利用分光光度法测定微量铁的原理； 能够利用分光光度法对微量铁进行测定； 学会标准曲线法处理实验数据的方法； 锻炼学生的团队协作能力和语言表达能力。 教学方法： 引导文教学法； 教学做一体； 演示教学法。 课堂讲解 教学学时： 每6人为一组，用一台分光光度计和整套的仪器设备，进行现场讨论和操作。本次内容共需8学时。 教学过程设计： 提问式引入本次课程的内容（0.5学时） 相关知识点的讲解，同学们作笔记（2学时） 根据讲解的内容，结合本次实训的内容进行实验过程设计和讨论（1学时） 讲解仪器的使用方法（0.5学时） 由同学们分组完成试样的测定，得到结果（2学时） 对实训过程中出现的问题进行总结，提出分光光度法操作中的注意事项（0.5学时） 讲解数据处理的方法（标准曲线法）（0.5学时） 布置下一次课程的任务，课后完成实验报告（0.5学时） 整理实验台，打扫实验室卫生，离开实验室（0.5学时） 教学内容： 讲解知识点，让学生对分光光度法有一个整体的认识。 1、朗伯-比尔定律 当一束平行的单色光通过均匀而透明的溶液时部分光被溶液所吸收，因此透过溶液的光通量减少。设入射光通量为Φ0，通过溶液后透射光通量为Φtr，则比值Φtr /Φ0表示溶液对光的透射程度，符号为τ，其值可以用小数或百分数表示：τ=Φtr /Φ0，透射比倒数的对数表示溶液对光的吸收程度，用A表示即A=lgΦ0/Φtr=-lgτ，当入射光全部透过溶液时Φtr =Φ0，τ=1（或100%），即A=0；当入射光全部被溶液吸收Φtr=0，τ=0，即A→∞。理论推导和实践都证明：一束平行单色光垂直入射通过一定光路长度的均匀溶液，即当入射光通量一定时溶液的吸光度与吸光物质浓度及光路长度的乘积成正比，这就是光的吸收定律又称朗伯-比尔定律，即： A=Kbc （3-1-1） 式中 b——吸收池内溶液的光路长度，cm； c——溶液中吸光物质的浓度； K——吸光系数。 当溶液的浓度用物质的量浓度（mol/L）表示，吸收池溶液的液层厚度以厘米（cm）表示时，相应的比例常数K称为摩尔吸光系数，以ε表示，其单位为L/(mol·cm) 2、可见分光光度法的实验技术 （1）样品的制备： 分光光度分析法通常是在溶液中进行，因此固体样品需要转变为溶液。 对于无机样品，首先考虑能否溶于水，若能溶于水中，应选择用蒸馏水配制成适当浓度的溶液；若样品不能溶于水中，则应考虑用稀酸、浓酸或混酸等将其处理后并配制成适当的浓度。 有机样品用有机溶剂溶解或抽提，或者经过高温灰化后溶解，配成适合于测定的浓度范围。 ） 注意事项： ①绘制工作曲线的随意性会导致线性不好,所得数据计算结果的差别也就大，结果的相对误差也无法控制。 ②工作曲线应为一条直线，不是折线或曲线； ③工作曲线的绘制时,要注意直线上下两侧的实验点数应相当。 （2）标准加入法 样品组成比较复杂，难于制备组成匹配的标样时用标准加入法。将待测试样分成若干等份，分别加入不同已知量0, C1, C2…, Cn的待测组分配制溶液。由加入待测试样浓度由低至高依次测定上述溶液的吸收光谱，作一定波长下浓度与吸光度的关系曲线，得到一条直线。若直线通过原点，则样品中不含待测组分；若不通过原点，将直线在纵轴上的截距延长与横轴相交，交点离开原点的距离为样品中待测组分的浓度。 4、分光光度计的仪器结构 仪器的组成构造：光源→单色器→吸收池→检测器→信号显示系统 光源的作用：供给符合要求的入射光。 可见光源：钨丝灯、卤钨灯； 紫外光源：氢灯、氘灯等。 单色器的作用：把光源发出的连续光谱分解成单色光，并能准确方便地“取出”所需要的某一波长的光。 单色器的组成：单色器主要由狭缝、色散元件和透镜系统组成。 棱镜单色器、光栅单色器。 吸收池的规格：0.5、1、2、3cm；材质：玻璃和石英。 检测器的作用：利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号。 信号显示系统：将检测器的电信号经过放大后，以一定的形式显示，方便计算和记录。 实验过程控制： 1、在铁标准液和试液中加入盐酸羟胺溶液、 邻二氮菲溶液、醋酸钠溶液有何现象产生？它们各自的作用是什么？ 2、在配制溶液的时候，未知试液与标准溶液同时配制的目的是什么? 3、为什么选择试剂空白？其作用是什么？ 4、工作波长为什么选择为 510nm？ 技能训练一：邻二氮菲分光光度法测定铁 一、训练目的 1、掌握721（或其它）分光光度计的使用方法； 2、学习邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。 二、实验原理 邻二氮菲和Fe2+在PH=3～9的溶液中形成橙色的络合物，