生化课程论文萌发小麦种子淀粉酶学的测定.docxVIP

生物化学论文——萌发小麦种子中淀粉酶酶学性质研究学院：生命科学学院学号：级：生科1101班姓名：冯旭萌发小麦种子中淀粉酶酶学性质研究冯旭，张仲文2（东北农业大学生命科学学院，哈尔滨 150030）摘要：测定萌发小麦种子中淀粉酶的活性并对淀粉酶的活性影响因素进行讨论，对淀粉酶活性的测定是通过测定淀粉酶分解淀粉所得产物——麦芽糖的量来表示酶的活性。麦芽糖能将3、5—二硝基水杨酸还原成棕红色的氨基化合物（520nm处有最大吸收峰），其颜色深浅与麦芽糖浓度成正比，利用分光光度法测定棕红色的氨基化合物吸光值，从而得到产物麦芽糖的量，来表示酶的活力[1]。定性分析了温度，PH值及激活剂和抑制剂对淀粉酶活性的影响（利用分解剩余的淀粉和碘液呈蓝色的程度来进行比较）。由此得到最适宜的温度和PH值，以及抑制剂和激活剂的种类。关键词：淀粉酶、温度、PH、抑制剂、激活剂、分光光度计The research of amylase from sprouting wheat seedFeng Xu1 , Zhang Zhongwen2 (College of Agriculture, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China)Abstract: Determine the amylase activity from sprouting wheat seed and discus the reason that have influenced the activity of amylase. Theway to determine the amylase is by determines the content of Malt sugar from starch. Malt sugar cans reduction 3, 5 two salicylic acid to azyl_compound (have the maximum absorption on 520nm), the color will be deep when it has much Malt sugar. We can determine the amylase activity by this way. We always analyses the effect of temperature, PH, activator and restrainer to the activity of amylase, then draw a conclusion what temperature, PH, activator and restrainer is the best to amylase.Key word: Amylase; temperature; PH; activator; restrainer; spectrophotometer本实验以萌发的小麦种子为材料，提取得到了淀粉酶，利用α－淀粉酶和β－淀粉酶的活性对温度的差异，分离出α－淀粉酶，并测定了α－淀粉酶的活性和α－淀粉酶和β－淀粉酶的总活性，计算出β－淀粉酶的活性，然后对淀粉酶活性影响因素进行了讨论。不同温度、PH条件下和抑制剂﹑激活剂情况下淀粉酶对淀粉水解的程度不同，通过定性的分析温度、PH值和抑制剂﹑激活剂对淀粉酶活性的影响。由此得到酶活性的最适宜的温度和PH值，以及抑制剂和激活剂的种类。1 实验材料与方法1．1材料 小麦（Triticum aestivum L.）、电子天平、研钵、容量瓶、量筒、刻度试管、试管、移液管、离心机、离心管、恒温水浴锅（40度、100度）、分光光度计、1％淀粉溶液、0.4mol/LNaOH、pH=3.0、5.6、8.0的柠檬酸缓冲液2实验方法2．1麦芽糖标准曲线的制作2．1．1实验原理：植物中的淀粉酶能将贮藏的淀粉水解为麦芽糖。淀粉酶几乎存在于所有植物中有α－淀粉酶及β－淀粉酶，其活性因植物生长发育时期不同而有所变化，其中以禾谷类种子萌发时淀粉酶活性最强。α－淀粉酶和β－淀粉酶都各有其一定的特性，如β－淀粉酶不耐热，在高温下容易钝化，而α－淀粉酶不耐酸，在pH3.6以下容易发生钝化。通常酶提取液中同时存在两种淀粉酶，测定时，可以根据他们的特性分别加以处理，钝化其中之一，即可以测出另一种酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β－淀粉酶，便可测定α－淀粉酶的活性。或者将提取液用pH3.6的醋酸在0℃加以处理，钝化α－淀粉酶，以测出β－淀粉酶的活性。淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖，可用3,5－二硝基水杨酸试剂测定。由于麦芽糖能将后者还原成3－氨基-5-硝基水杨酸的显色基团，在一定范围内其颜色