纯牛奶对大鼠应激性溃疡的影响研究.docVIP

实验名称：探究纯牛奶对大鼠应激性溃疡的影响 年级： 班级： 姓名： 学号： 日期： 实验流程： 一、项目名称 探究纯牛奶对大鼠应激性溃疡的影响 二、实验目的 应激性溃疡是指在大面积烧伤、严重创伤、休克、败血症、脑血管意外和严重心理应激（如精神创伤、过度紧张）等应激状态下所出现的胃、十二指肠黏膜的急性损伤，其主要表现胃及十二指肠黏膜的糜烂、溃疡、出血[1]。近年来，应激性溃疡的发病率有增高的趋势，主要原因是由于重症监护的加强，生命器官的有效支持，以及抗感染药物的更新，增加了发生应激性溃疡的机会。由于牛奶的营养价值高且有较好的润滑特性，一直被广泛用于溃疡病的饮食预防和治疗，直到后来研究表明，胃溃疡病人常饮牛奶不不利于溃疡愈合，牛奶中含有丰富的蛋白质和钙质，均能促进胃酸分泌，因而不利于溃疡愈合[2]。目前国内关于牛奶对应激性溃疡影响作用的研究报道并不多见，因此，本实验采用大鼠束缚水浸法复制应激性胃溃疡模型，观察纯牛奶对大鼠应激性胃溃疡的影响作用，旨在为临床应激性溃疡饮食治疗提供理论依据。 三、实验内容 实验对象：SD大鼠40只，体重200～240g，雌雄均可。 实验药品：纯牛奶（蒙牛牌250ml装）、生理盐水、100g/L的福尔马林水溶液。 实验器材：手术器械（鼠固定板、手术剪、镊子）、灌胃管、注射器（5ml）、游标卡尺。 实验环境：温度18℃～25℃，湿度50%～60%，自然通风。 动物分组:将小鼠随机分成4组，每组10只，分别为高剂量组、中剂量组、对照组、自然组，各组编号1～10。 建立模型：采用灌胃法给药，高剂量组给l.5ml/100g纯牛奶，中剂量组给1.0ml/100g纯牛奶，对照组给1.5ml/100g生理盐水，高剂量组、中剂量组、对照组均采用束缚水浸法建立应激性溃疡模型。自然组不做处理。 结果分析：观察胃粘膜损伤的程度和形态，胃壁按溃疡或糜烂面积大小给予计分，损伤分数的判定参考Guth的方法，数据以“均数±标准差”表示，采用单因素方差分析(F检验和q检验)两两比较高剂量组、中剂量组、对照组和自然组的结果，P0.05表示差异有显著性[3]。 实施方案 灌胃：以左手拇指和食指捏住大鼠耳朵处头颈部皮肤，其余三指将大鼠背部固定手掌大鱼际肌上，使其头颈部充分伸直（图1）。右手持灌胃器将灌胃管自口角插入口腔，紧贴上颚，至咽后壁。用灌胃管轻压大鼠上颚部，使口腔和食管成一直线，再将灌胃管自咽后壁缓缓插入至预定深度（图2），如无呼吸困然，即可将溶液注入[4]。给药剂量见实验内容。 应激：采用束缚水浸法复制大鼠应激性溃疡。实验前禁食24h，禁水1h，将四肢及头部束缚于鼠固定板上，将鼠板垂直浸入（18～21）℃水浴中,水面平胸骨剑突，各组应激持续时间均为6h。自然组放在相同室温环境下，不做应激处理。 取胃：采用颈椎脱臼法处死大鼠：用镊子或用左手拇指与食指向下压住大鼠头部枕骨处，另一只手抓住鼠尾用力向后拉，使之颈椎脱臼，鼠立即死亡。打开腹腔，暴露鼠胃，将胃幽门口结扎后取出，置于100g/L福尔马林水溶液中浸泡。30min后沿胃大弯剪开并展平，用小棉球轻轻将胃粘液及血凝块擦掉，观察胃粘膜损伤的程度和形态。 计算：胃壁按溃疡或糜烂面积大小给予计分，损伤分数（溃疡指数）的判定参考Guth的方法，①点状溃疡：每3个点状溃疡（粘膜缺损小于1mm或出血性糜烂小点,称点状溃疡）计1分②条状出血：以游标卡尺测量溃疡面的最大长径和垂直于最大长径的最大宽径，宽为1mm者每mm长为1分；2mm宽者每mm长为2分；3mm宽者每mm长为3分[5]，测得溃疡指数填于下表。 5.分析：两两比较四组之间溃疡指数分值（平均值±标准差），采用单因素方差分析(F检验和q检验)，P0.05表示差异有显著性。 [1]李桂源.病理生理学[M].北京:人民卫生出版社，2010：189 [2]张爱军.胃溃疡病人的饮食误区[J].山东食品科技，2001，11：35 [3]温瑞兴，肖向茜.药理学实验教程[M].北京工业大学出版社，2014，36-42 [4]林旭，佘菲菲.生物医学常用实验技术[M].北京：科学出版社，2014：49 [5]刘立伟，王振军，高慧英，王新成，王洪海.溃疡康对小鼠应激性胃溃疡干预效果的实验研究[J].泰山医学院学报，2007，28(2)：82 实验设计，材料准备 分组：大鼠40只，分高剂量组、中剂量组、对照组和自然组四组，每组10只 得出结论 分析：分别计算四组溃疡指数（均值±标准差），两两做比较 观察：观察大鼠胃溃疡情况，按Guth法计算溃疡指数 取胃：处死大鼠，将胃取出，沿胃大弯剪开并展平 应激：高剂量组、中剂量组、对照组均采用束缚水浸法建立应激性溃疡模型，自然组不做处理 给药：采用灌胃法， 高剂量组：1.5ml/100g纯牛奶 中剂量组：