临床病原微生物标本及其耐药机制检测.pptVIP

临床微生物及其耐药机制检测 安徽省细菌耐药监控中心 安徽医科大学临床检验诊断学教研室 安徽医科大学第一附属医院检验科 徐元宏 一、正确留取标本是获得准确结果的前提 1.血液、骨髓、无菌体液： （1）严格消毒、避免体表正常菌群的污染。 （2）应在抗生素使用之前抽血。如果病人已使用抗生素，应选择含中和剂（活性炭、中性树脂）的培养瓶，或在下次用药前采血。 （3）由于血液、骨髓、无菌体液含有极少量的病原体，就可以造成感染性疾病，而实验室检出率与病原体数量有关，并非只要有病原体就能检验出来，因此血液、骨髓、无菌体液等必须增菌才能获得满意结果。 成人未使用抗生素治疗采集骨髓0.5-1毫升，血液、胸腹水、关节液3-10毫升接种成人培养瓶（蓝盖）；成人已使用抗生素治疗采集上述标本接种加中性树脂培养瓶（灰盖）；儿童采集骨髓0.5-1毫升，血液、胸腹水，关节液1-3毫升接种儿童培养瓶（红盖）；厌氧培养接种上述标本3-10毫升于厌氧培养瓶（黄盖）。 （4）由于菌血症、败血症是间歇排菌，应在发热高峰时采血，对于感染性心内膜炎患者增加采血次数，以提高阳性率。 2.导管相关性的血流感染（CRBSI）血培养 （1）第一采集方法 经外周静脉穿刺采血》1套（送两个培养瓶）；从导管中心或静脉留置口隔膜采血1套，两者的采血时间应该接近（《5分钟）。 结果解释： （a）依据细菌鉴定贺药敏试验确认，若两套阳性血培养是同一种细菌，又没有其它部位的感染，提示CRBSI； （b）若两套阳性血培养瓶是同一种细菌，从导管采血血培养报告阳性时间比外周静脉穿刺采血早》120分钟，又没有其它部位的感染，提示CRBSI； （c) 依据细菌鉴定贺药敏试验确认，若两套阳性血培养是同一种细菌，又没有其它部位的感染，从导管采血血培养报告阳性时间比外周静脉穿刺采血不足120分钟，提示CRBSI； （d）若外周静脉穿刺采血血培养是阴性，只有导管采血的血培养是阳性，不能定为CRBSI； （e）若只有外周静脉穿刺采血的血培养是阳性，但分离菌为金黄色葡萄球菌或念珠菌，且没有任何其它部位感染的证据，提示高度可疑为CRBSI； （f）若再次导管采血/外周采血，若培养阳性，且是同一种细菌，可定为CRBSI； （2）第二种采集方法： 外周静脉穿刺采血采集1～2套，同时拔出导管，用Maki导管平皿滚动法，对导管尖片段进行半定量培养。 结果解释： （a）如果两套外周静脉穿刺采血培养是阳性，导管片段培养为阳性（》15CFU/平皿），提示为CRBSI； （b）如果两套外周静脉穿刺采血培养是阴性，导管片段培养为阳性，提示可能为导管上的定植菌，不支持CRBSI； （c）若所有的血培养和导管片段培养是阴性，不太可能是CRBSI； （d）如果有》1套的血培养是阳性，导管片段的培养是阴性，但分离株是金黄色葡萄球菌或念珠菌，且没有任何其它部位的感染证据，提示仍有可能是CRBSI。 3.尿液： （1）导尿法：是一种较好的无菌采集法，主要适用于手术后患者，取10-15毫升尿液于无菌容器内送检，但留置导尿管易造成医院内感染。 （2）中段尿采集法：是临床上最多采用的方法，女性病人先以肥皂水或1：1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴及阴道口；男性病人应翻转包皮冲洗，用1：1000新洁尔灭消毒尿道口，在用无菌纱布擦干，让病人排尿，弃去前段尿，收集中段尿10—20ml，盛于无菌容器内，立即加盖送检。 （3）肾盂尿采集法：为确定菌尿是否来自肾脏，可用导尿管采集肾盂尿。首先充分冲洗膀胱，以最后一次冲洗尿作对照，后用导尿管插入输尿管，分别标记左右侧，收集3次尿；如果输尿管菌数比对照尿菌数多或第3次尿中菌数比第1次多，该菌尿可能来自肾脏。反之，如果第1次尿菌数多于第3次尿菌数，则可能来自膀胱。肾盂尿采集法一般应该请泌尿科医师协助进行，并确实做好标记，以防左右侧搞错。 （4）膀胱穿刺尿采集法：将病人耻骨上皮肤碘酒、酒精消毒后，以无菌针筒作膀胱穿刺。此法主要用于尿液中厌氧菌的培养，故在取得尿液后，针头插于橡皮塞上送检。当儿童或婴儿采集中段尿困难或培养结果与患者病情有矛盾时，可考虑用此法采集尿液。 （5）留尿法：尿液检查结核分枝杆菌时，可用一洁净容器，留取24h的尿液，取其沉淀部分200-250毫升盛于清洁瓶内送检。实验室人员接受后应全部离心，涂片镜检。 4.痰液：正常人下呼吸道是无菌的，上呼吸道有正常菌群寄居。下呼吸道的分泌物必须通过上呼吸道，常受上呼吸道的正常菌群的污染。因此对于下呼吸道分泌物培养出来的结果必须分析、判断。一般要求病人清晨用无菌生理盐水漱口6次，再用冷开水漱口一次，用力咳深部的痰液于无菌容器内送检，避免口水的污染。对于痰液不能自主咳出，可采用高渗盐水雾化吸入排痰。 实验室在收到痰标本，涂片革兰染色（SEC10/LPF，WBC25/LP