专题二：1微生物的实验室培养.ppt

微生物基础知识 朊病毒（蛋白质病毒） 细菌的外形与大小 细菌：单细胞不分枝的原核微生物。 细菌细胞微小而透明，通常用适当染料染色后显微镜观察 细菌的构造 细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌（纤）毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质，细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质(拟核DNA)等。 *细胞壁 结构特点：坚韧且有弹性 细胞壁有哪些功能？ ①固定细胞外形； 孢子:在生物体的一定部位产生一种特殊的生殖细胞叫孢子。孢子的特点是能直接长成新个体。 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。 1、自养菌（autotroph） 2、异养菌（heterotroph） （1）腐生菌 （2）寄生菌：大部分病原菌 构成微生物细胞的组成成分 调解微生物细胞的渗透压， PH值和氧化还原电 位 有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源 构成酶活性基的组成成分，维持酶活性。Mg、Ca、K是多种酶的激活剂 构成微生物细胞以C、H、O、N、P、S六种元素为主，约占细胞干重的95％以上； Ca、K 、Mg、Fe为大量元素，以无机盐阳离子形式被吸收，配培养基要加磷酸盐、硫酸盐。 Zn、Ca、Mn、Co、Mo等微量元素，在微生物培养中有0.1PPM就可以了，自来水原料中已够用，不需另加。 是细胞中生化反应的良好介质；营养物质和代谢产物都必须溶解在水里，才能被吸收或排出体（细胞）外。 水的比热高，能有效的吸收代谢过程中放出的热量，不致使细胞的温度骤然上升。 维持细胞的膨压（控制细胞形态）。 包器材 平板划线时不能划破培养基 1、一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 2、二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 2.稀释涂布平板法:将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落（单细胞菌落） 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 微生物的恒温培养 微生物的恒温培养:将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱中培养12—24h后，分别观察并记录结果： （1）按物理状态来分： 2.培养基的类型和用途 固体培养基：用于菌种分离、计数和菌种鉴定； 半固体培养基：观察微生物的运动，保藏菌种； 液体培养基：常用于发酵工业等； 固体培养基：菌落，菌苔 半固体培养基： 无动力 有动力(弥散) (是否运动) 液体培养基： 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 选择培养基：加入某种化学物质，抑制不需要的微生物的生长， 促进或选择具有特定表型的微生物生长的培养基；如： 青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌（抑制放线菌和细菌） 高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌（抑制多种细菌生长） 加入抗生素的培养基:分离导入目的因基的受体细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的（HAT）培养基: