抑制螺旋藻胞内核酸酶活性的研究 - 海洋科学.PDFVIP

研究报告 ΡΕΠΟΡΤΣ 抑制螺旋藻胞内核酸酶活性的研究 柯珍恋 徐 虹 章 军 厦门大学生命科学学院 细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室 厦门 提要 螺旋藻细胞内较高的胞内核酸酶活性是外源基因转化螺旋藻的主要障碍 以供体质 ∀ 粒 为酶消化底物 通过多种方法处理螺旋藻细胞 然后检测其胞内核酸酶粗提液对 ∞×≥ 的降解作用 结果表明 以上的 处理 或无 螺旋藻培养基培养 ∞×≥ ∞⁄× 以上 都可使处于对数生长期的螺旋藻胞内核酸酶活性显著降低 低于 如 培 ε ε 养也可降低螺旋藻的胞内核酸酶活性 根据实验结果 建议在螺旋藻转化前 开始低温 无 ∀ ! 培养 转化前 提高培养基中 的浓度至 就能获得胞内核酸酶活性极低 ∞⁄× 的受体藻有利于外源基因的转化∀ 关键词 螺旋藻 胞内核酸酶 低温培养 处理 无 培养 ∞⁄× 中图分类号 ± 文献标识码 文章编号 螺旋藻是众所周知的优良天然营养源 由于其 质粒 由本实验室构建 ∞×≥ 基因组结构简单便于遗传操作 对外源蛋白的容受力 培养基 ≈ ! ∏∏ ∀ 高!繁殖迅速 再生快 培养条件简单 成本低廉等诸! ! ! 方法 多优点而使其成为极具潜力的基因工程受体藻∀但 是尽管有不少研究者在螺旋藻基因工程方面开展了 螺旋藻的培养 在ε 光照强度为 大量的工作 进行了不懈的努力 但其进展依然缓 ¬的条件下培养∀ 慢 其主要原因目前尚不很清楚 但许多研究者认为 胞内核酸酶活性的检测方法 螺旋藻 ∀ 胞内核酸酶粗提液的制备 取 螺旋藻藻液 低速 螺旋藻细胞内存在丰富的高活性核酸酶 能阻止外源 离心 收集 用不含 的 的