肾盂恒压灌注下灌注时间对兔肾脏损伤的实验研究.pdfVIP

目 录 中文摘要 Ⅰ 英文摘要 Ⅱ 英文缩略词Ⅳ 前言1 材料和方法3 1.材料3 1.1 主要试剂及药品3 1.2 主要仪器设备4 1.3 实验动物分组4 2.方法4 2.1 技术路线4 2.2 动物模型的建立5 2.3 HE 染色5 2.4 投射电镜切片7 2.5 二十四小时蛋白尿测定8 2.6 结果判断标准8 2.7.统计分析8 3.结果分析8 3.1 二十四小时尿蛋白结果9 3.2 HE 染色结果9 3.3 投射电镜结果10 讨论11 结论19 参考文献20 文献综述23 致谢28 作者简介29 导师评阅表30 摘 要 目的 探讨肾盂恒压灌注下灌注时间与兔肾脏损伤的关系。 方法 采用新西兰大白兔64 只，随机建立肾盂灌注30 分钟、60 分钟、90 分钟及假手术组 动物模型，每组16 只。灌注压力维持在100cmH 0，灌注液为生理盐水。分别于术后1 天、 2 5 天留取灌注侧尿液，行24 小时尿蛋白测定，留取尿液后于术后1 天、5 天分批处死各组兔 子，取灌注侧肾脏标本，行HE 染色及透射电镜检查。 结果 灌注一天后行24 小时蛋白尿测定：假手术组，灌注30 分钟组，灌注60 分钟组，灌注 90 分钟组的 24 小时尿蛋白分别为（0.170±0.006 ），（0.682±0.031 ），（0.772±0.013 ）， （0.851±0.037 ）g/24h ，组间比较差异均有统计学意义 （P ＜0.05 ）；灌注五天后行 24 小时 蛋白尿测定：假手术组，灌注30 分钟组，灌注60 分钟组，灌注90 分钟组的24 小时尿蛋白 分别为（0.164±0.013 ），（0.180±0.007 ），（0.232±0.022 ），（0.405±0.059 ）g/24h，组间 比较差异均有统计学意义（P ＜0.05 ）；各灌注组中灌注后一天与灌注后五天24 小时尿蛋白 比较有统计学意义（P ＜0.05 ）；假手术组灌注后一天与灌注后五天24 小时尿蛋白差异比较 无统计学意义（P ＞0.05 ）。HE 染色显示：术后第一天假手术组肾小球结构正常，血管球内 皮细胞及系膜细胞无肿胀，肾小管结构规整，上皮细胞呈立方状，无肿胀。灌注30 分钟组 肾小管上皮细胞体积明显增大，轻度水肿，胞质淡染呈细颗粒状。灌注60 分钟组肾小球轻 度萎缩，肾小管管壁变薄，管腔增大，个别管腔内见少量管型。灌注90 分钟组肾小管上皮 细胞明显肿胀，胞质疏松，中-重度水肿，管腔内见大量蛋白管型。术后第五天假手术组肾 内毛细血管扩张充血。肾小球结构正常，血管球内皮细胞和系膜细胞无肿胀，肾小管上皮细 胞呈立方，无肿胀。灌注30 分钟组肾小管上皮细胞体积稍增大，轻度肿胀。灌注60 分钟组 肾小管上皮细胞体积明显增大，轻-中度水肿，胞质淡染呈细颗粒状。灌注90 分钟组肾小管 重度水肿，见有上皮细胞坏死脱落入管腔内，管腔内管型明显，并见有细胞管型。透射电镜 下观察显示：术后第一天假手术组：肾小管微绒毛排列整齐，上皮细胞未见水肿，内质网、 溶酶体及细胞核未见明显异常；术后第一天灌注30min 组肾小管上皮细胞水肿样改变，各细 胞器未见明显异常；灌注60min 组可见溶酶体明显增多，小管腔内可见碎片较多，内质网扩 张明显，微绒毛排列不整齐；灌注90min 组可见肾小管腔内红细胞，肾小管微绒毛排列不整 齐，溶酶体增多，细胞核异染色质增多。术后第5 天假手术组可见肾小管微绒毛排列整齐， 上皮细胞未见水肿，内质网、溶酶体及细胞核未见明显异常；灌注30min 组可见内质网轻度 水肿，肾小管微绒毛排列整齐，余细胞器未见明显异常；灌注60min 组可见肾小管微绒毛排 列不整齐，小管腔内碎片增多，细胞间隙增宽；灌注90min 组可见溶酶体增多，肾小管上皮 细胞水肿样改变，内质网扩张呈囊泡样改变。 结论 当肾盂灌注压力为 100cmH O,灌注时间在 30～90 分钟时，肾脏结构和功能 2 会出现不同程度的损伤，且肾脏损伤的程度会随着灌注时间的延长不断加重。但 在本实验设定的实验条件下肾脏结构和功能可以得到不同程度的恢复，因此在此 灌注压力及灌注时间范围内造成的肾脏损伤为可逆损伤。 【关键词】肾盂灌注；肾脏损伤；尿蛋白 论文