11实验十一槐花的质量检验.ppt

实验十 槐花的质量检验 实验目的 了解中药分析检验常用的方法与特点； 熟悉连续回流提取法； 掌握黄酮类化合物的性质、鉴别及比色法含量测定的方法。 实验原理一 槐花 (Flos sopuorae) 为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花及花蕾。夏季花开放或花蕾形成时采收，及时干燥，除去枝、梗及杂质。前者习称“槐花”，后者习称“槐米”。 实验原理二 槐花中主要含黄酮类化合物，其代表性化合物为芦丁。根据中华人民共和国药典2005年版一部，本品按干燥品计算，含无水芦丁（C27H30O16）槐花不得少于6.0%；槐米不得少于15.0%。 盐酸-镁粉（或锌粉）反应 为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应，反应机理认为是因生成阳碳离子缘故。 与铝盐反应 黄酮类化合物常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐、锶盐、铁盐等试剂反应，生成有色络合物。与1%三氯化铝或硝酸铝溶液反应，生成的络合物多为黄色并有荧光，可用于定性及定量分析。 实验原理三 连续回流提取法 需要用到索氏提取器 利用溶剂的回流和虹吸原理，对固体混合物中所需成分进行连续提取。当提取筒中回流下的溶剂的液面超过索氏提取器的虹吸管时，提取筒中的溶剂流回圆底烧瓶内，即发生虹吸。 随温度升高，再次回流开始，每次虹吸前，固体物质都能被纯的热溶剂所萃取，溶剂反复利用，缩短了提取次数。 连续回流提取法的提取效率较高，但缺点是耗时长，而且每次提取的量有限。 仪器与试药 试药 槐花，芦丁对照品（treechem)，青岛海洋硅胶预制板（GF254, 5x10cm），其它试剂均为分析纯 仪器 索式提取器、紫外-可见分光光度计 实验内容 鉴别 粉末鉴别（略） 化学鉴别（盐酸-镁粉反应） 取本品粉末0.1g，加乙醇10ml，加热5分钟，滤过。取滤液1ml，加镁粉少量与盐酸2～3滴，即显樱红色。 薄层鉴别 点样量：10μl 展开剂：乙酸乙酯－甲酸－水（8:1:1） 显色剂：1%三氯化铝-乙醇溶液 检测波长：365nm 结果判断：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点。 含量测定 供试品溶液的制备 取本品粗粉约1g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚150ml，加热回流至提取液无色，放冷，弃去石油醚液。再加甲醇90ml，加热回流至提取液无色，移置100ml 量瓶中，用甲醇少量洗涤容器，洗液一同并入量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。 对照品溶液的制备：浓度为 mg/ml 含量测定条件 精密量取供试品溶液1.0ml置25ml量瓶中，加水至6ml，加5％亚硝酸钠溶液1.0ml，使混匀，放置6.0min，加10％硝酸铝溶液1.0ml，摇匀，放置6.0min，加氢氧化钠试液10.0ml，再加水至刻度，摇匀，放置15min，以水同法空白，在510nm处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 标准曲线的绘制（见实验指导P34） 精密量取对照品溶液0ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml与6.0ml，分别置25ml量瓶中，各加水至6ml，按含量测定项下方法显色，在510nm处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，标准品质量为横坐标，绘制标准曲线。 标准曲线的绘制 含量测定 从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量(μg)，计算即得。 思考题 先用乙醚连续回流提取的目的是什么？ 本品与镁粉-盐酸反应鉴别的化合物的类别是什么？反应原理是什么？ * 槲皮素-3-O-芸香糖苷 水浴加热 浓度： mg/ml 6 5 4 3 2 1 序号 5.0 A510 M (mg) 6.0 4.0 3.0 2.0 1.0 V（ml） PowerPoint Template Contents Click to edit Master title style Competitors You may want to allocate one slide per competitor Strengths Your strengths relative to competitors Weaknesses Your weaknesses relative to competitor Diagram 1 Diagram 2 Diagram 3 Chart 1 Click to edit Master title style Click to edit Master title style Chart 2 Chart 3 Thank you Logo * Logo Add Your Company Slogan Content Title 1 1 Content Title 2 2 Content