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微生物培养基试剂
附录 2 实验用培养基配制
无碳培养基:NaCl 0.5 g; NH4NO3 1.0 g; (NH4)2SO4 0.5 g; K2HPO4 1.5 g; KH2PO4 0.5 g; MgSO4?7H2O 0.2 g; 去离子水 1000 ml;PH自然。121℃灭菌20分钟。
无氮培养基:NaCl 0.5 g; 葡萄糖 1.0 g; K2HPO4 1.5 g; KH2PO4 0.5 g; MgSO4?7H2O 0.2 g; 去离子水 1000 ml;PH自然。115℃灭菌30分钟。
5. 察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养) 蔗糖30g, NaNO3 2g, K2HPO4 1g, MgSO4·7H2O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4·7H2O 0.1g, 水1000mL, pH7.0~7.2
1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养) 牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g, 水1000mL, pH7.4~7.6
2. 高氏1号培养基(用于放线菌培养) 可溶性淀粉20g , KNO3 1g, NaCl 0.5g, K2HPO4·3H2O 0.5g, MgSO4·7H2O 0.5g, FeSO4·7H2O 0.01g, 水1000mL, pH7.4~7.6。配制时注意,可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏(Martin)培养基(用于从土壤中分离真菌)K2HPO4 1g, MgSO4·7H2O 0.5g, 蛋白胨5g, 葡萄糖10g, 1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL, 自然pH, 121℃湿热灭菌30min. 待培养基融化后冷却55~60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL).
4. 马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养) 马铃薯(去皮)200g, 蔗糖(或葡萄糖) 20g, 水1000mL, 配制方法如下: 将马铃署去皮,切成约2cm2的小块,放入1500mL的烧杯中煮沸30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底, 然后用双层纱布过滤, 取其滤液加糖,再补足至1000mL, 自然pH. 霉菌用蔗糖, 酵母菌用葡萄糖.
6. Hayflik培养基(用于支原体培养) 牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g, NaCl 5g, 琼脂15g, pH7.8~8.0, 分装每瓶70mL, 121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL, 15醋酸铊水溶液2.5mL, 青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL, 以上混合后倾注平板. 注意:醋酸铊是极毒的药品,需特别注意安全操作.
7.麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基) 葡萄糖0.1g, KCl 0.18g,酵母膏0.25g,醋酸钠0.82g, 琼脂l.5g,蒸馏水l00mL。溶解后分装试管,1l5℃湿热灭菌15min。
8.葡萄糖蛋白胨水培养基(用于V.P.反应和甲基红试验) 蛋白胨0.5g,葡萄糖0.5g,K2HPO4 0.2g,水100mL, pH7.2, 1l5℃湿热灭菌20min。
9.蛋白胨水培养基(用于吲哚试验) 蛋白胨10g, NaCl 5g, 水1000mL,pH7.2~7.4, 121℃湿热灭菌20min。
10.糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验) 蛋白胨0.2g, NaCl 0.5g, K2HPO4 0.02g,水100mL,溴麝香草酚蓝(1%水溶液) 0.3mL,糖类lg。分别称取蛋白胨和NaCl溶于热水中,调pH至7.4,再加入溴麝香草酚蓝(先用少量95%乙醇溶解后,再加水配成1%水溶液),加入糖类,分装试管,装量4~5cm高,并倒放入一杜氏小管(管口向下,管内充满培养液)。115℃湿热灭菌20min。灭菌时注意适当延长煮沸时间,尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。常用的糖类,如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等(后两种糖的用量常加大为1.5%)。
11. RCM培养基(强化梭菌培养基) (用于厌氧菌培养) 酵母膏3g,牛肉膏l0g,蛋白胨10g,可溶性淀粉lg,葡萄糖5g, 半胱氨酸盐酸盐0.5g,NaCl 3g,NaAc 3g, 水l000mL, pH8.5,刃天青3mg/L, l2l℃湿热灭菌30min。
12. TYA培养基(用于厌氧菌培养) 葡萄糖40g,牛肉膏2g,酵母膏2g,胰蛋白胨(bacto-typetone)6g,醋酸铵3g, KH2PO4 0.5g,MgSO4·7H2O 0.2g,FeSO4·7H2O 0.01g,水1000mL, pH6.5, 121℃湿热灭菌30min。
13.玉米醪培养基(用于厌氧菌培养) 玉米粉65g,自来水1000mL,混匀,煮1
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