1脂类的测定索氏抽提法.pptVIP

学习目标 知识目标： 1.会说出索氏抽提法测脂肪原理； 2.会说出索氏抽提法操作过程及注意事项； 3.能说出脂类常用测定方法的适用范围和各自特点； 技能目标： 1.会熟练安装和操作索式提取器测定脂肪； 2.能熟练控制乙醚回流虹吸的速度； 3.会正确回收和使用乙醚/石油醚等有机溶剂； 4.能根据食品中脂肪存在状态及食品组成，正确选择脂肪的测定方法； 5.能根据正确评价食品中脂肪含量是否符合标准。 素质目标： 1.培养学生严谨、务实的学习精神； 2.培养学生开拓创新、团结协作的职业素质。 检测依据 基础知识 试样用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后，蒸去溶剂所得的物质，称为粗脂肪。因为除粗脂肪外，还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。抽提法所得的脂肪为游离脂肪。 是一种半连续溶剂萃取法。 是我国国家标准第一法。 任务一 仪器及试剂准备 仪器 索氏抽提器；接收瓶；冷凝管；恒温水浴锅；分析天平；恒温干燥箱；干燥器； 接收瓶：恒重称量 水浴锅：加水 试剂 （1）乙醚脱脂过的滤纸及白色棉线（做滤纸筒） （2）脱脂棉 （3）无水乙醚或石油醚 （4）海砂（防止暴沸,分散样品） 【问题探究】 1、提取剂的选择 采用低沸点的有机溶剂。常用的溶剂有乙醚、石油醚、氯仿-甲醇混合溶剂，也可使用几种溶剂进行混合。 ①乙醚 优点：溶解脂肪能力强，便宜，沸点低（34.6℃） 缺点：易燃，易爆（空气中最大允许浓度为400ppm） ，易饱和约2%的水分，含水后可抽提出糖分等非脂成分，且含水乙醚的抽提能力下降（用无水乙醚，且样品必须预先烘干），只能提取游离脂肪 ②石油醚 优点：比乙醚不易燃，比乙醚憎水，允许样品有少量水分 缺点：溶解脂肪能力比乙醚弱，沸点高为35-38℃，只能提取游离脂肪 对于结合脂肪，必须预先用酸或碱破坏结合才能提取。两种溶剂常混合使用。 ③氯仿-甲醇 对于脂蛋白、磷脂的提取率较高，特别适用于水产品、家禽、蛋制品等食品脂肪的提取。 2、提取剂的要求 抽提所用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无过氧化物，挥发残渣含量低。 水和醇类会导致糖类及水溶性盐类等物质的溶出，使测定结果偏高。 过氧化物导致脂肪氧化，在烘干时还有引起爆炸的危险。 任务二：样品预处理 肉松→研细→称取2.00～3.00g →滤纸筒 样品处理要求—干燥、粉碎 固体： 粉碎机粉碎过40目或组织捣碎机捣碎→称取2.00～5.00g （必要时拌以海砂）→滤纸筒 半固体和液体： 称取5.00-10.00g 于蒸发皿中→加入20g海砂→沸水浴蒸干→105℃烘干→研细→滤纸筒 任务三：成分分析 1.滤纸筒的制备 剪滤纸成长方形8×15cm →卷成圆筒，直径为2cm→将圆筒底部封好→装样 注：最好放一些脱脂棉，避免向外漏样 2.装置搭建 滤纸包→索氏提取器→连接已干燥至恒重的接收瓶→由下至上搭建，磨口位置固定→ 置于水浴中→冷凝水下进上出→上端连接氯化钙干燥装置或塞棉花 注意： 1、棉花作用：①防止空气水分进入②防止空气中杂质进入； 2、放入滤纸筒的高度不能超过回流弯管，否则乙醚不易穿透样品，使脂肪不能全部提出，造成误差。 3. 抽 提 由冷凝管上端加入无水乙醚（石油醚） 至接收瓶体积的2/3 恒温水浴中抽提（45-60℃） 抽提温度大约使乙醚每小时冷凝回流6～8次（回流速度8～10min/次） 一般抽提6～12h（2g肉松4～6h） 注意： 1、使用挥发乙醚或石油醚时，切忌直接用火源加热，应用电热套、电水浴、电灯泡等 2、控制水浴温度 4.终点判断 用洁净的玻璃棒从抽提器中蘸取乙醚液体至脱脂干燥滤纸上，根据油渍的痕迹判断。 如无油渍 抽提完毕 如有油渍 继续抽提 5.回收乙醚 取出滤纸筒→继续抽提→待提取器中乙醚稍低于虹吸管高度时→断开提取器和接收瓶→倾斜提取器由提取器的下端将乙醚虹吸转移至回收瓶中→重复操作→至接收瓶中乙醚残留1-2mL。 6.脂肪恒重称量 待接收瓶残留1-2mL乙醚→水浴蒸干→105℃干燥1h →冷却称量→至恒重 注意： 如质量增加，应以增重前的质量为恒量，因油脂氧化等原因会导致重量增加 有效数字： 计算结果保留到小数点后一位。 精密度： 在重复性条件下的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10% 1、样品中的脂肪怎样从样品中脱离出来？ 将经过前处理而分散且干燥的样品用无水乙醚或石油醚等溶剂通过反复多次“蒸馏→回流→提取”，使样品中的脂肪进入溶剂中。 2、脂肪怎样与溶剂分开？ 回收溶剂后所得到的残留物，即为脂肪（或粗脂肪）。 （1） 样品应干燥后研细 , 样品含水分会影响溶剂提取效果 , 而且溶剂会吸收