豆豉纤溶酶产生菌的筛选、培养及微生态制剂的研究.pdfVIP

摘 要 ● 摘 要 ～ 本文以从豆豉中得到产纤溶酶活性较高的菌株并将其保存为目的，利用纤维蛋白平 板筛选和纤溶活性测定相结合的方法进行菌株筛选，通过生理生化特征分析和16S rDNA扩增及序列测定的方法进行菌种鉴定，选用单因素试验和正交试验相结合的方法 进行产酶条件的优化，采用真空冷冻干燥的方法将菌株制成微生态制剂。 rDNA 化鉴定，初步鉴定3号菌株和9号菌株为枯草芽孢杆菌。再将3号菌株进行16S 扩增及序列测定，进一步确定3号菌株为枯草芽孢杆菌。 通过对3号菌株培养基的优化，确定最佳碳源为大米粉，最佳氮源为酵母膏，最佳 碳氮比为l：l，且碳源和氮源的浓度分别为2％。通过对离子组成和培养基的正交试验， 0．4％， 确定最佳培养基配方为大米粉2％，大豆粉2％，酵母膏0．896，麸皮0．75％，K2HP04 KH2P04 0．07％。 0．3％，CaCI：0．02％，MgS04 通过对发酵工艺条件优化，确定3号菌株的最佳发酵条件：初始pn值为7．5，发 摇床转速为180r／min。按照确定的培养基配方和发酵工艺条件对3号菌株进行发酵培养， 测定420nm处的OD值、pH值和纤溶活性，确定菌体生长和产酶过程并不是同步的， 菌体产酶的过程要滞后于菌体的生长过程。 通过耐受性试验，确定3号菌株对高温、酸碱和胆汁均有一定的耐受性，具有制备 微生态制剂的可行性。3号菌株经真空冷冻干燥制成菌粉，确定最佳单因素保护剂为甘 油6％，其添加量为保护剂：菌液=1：2(体积比)。通过正交试验确定最佳保护剂配方为 月的保存期后，其活菌存活率可达47．76％。 关键词：豆豉，纤溶酶，筛选，菌种鉴定，产酶条件，微生态制剂 Abstract Abstract This isto astrainwiththe ofthe fromfermented study get highlyactivity enzyme andstore strainwasscreened fibrin and soybean it，The byusing platefibrinolyticactivity 1 rDNAfor andits and6S strain assay morphology,physiology,biochemistry weaetested．Theconditionsand for and producingenzyme optimal orthogonalexperiments ofthestrainwerestudied． freeze-drying withthe ofthe areobtained Twostrains highactivityenzyme