真核表达质粒pcDNA3MDCIFNγVP1的构建及免疫效果研究.pdfVIP

＼呲Y州1吣8骶0叭叭0砒5州0l＼l＼4矾 目 录 OOOOOOOOOOOOOOOOODOOOO 中文摘要……………O O………………………………1 OOOO 英文摘要…………………………………O O…………………………4 效果研究 OOOO0…O”· OOIOOOO “一“…“““”一””· 前言……………………………D日U舌”““””””一””““一””“。 O……………………8 OOOOoooo 材料与方法…………………OI OOO000OOOOO……………………9 结果“““············…························OOOOOO·······················．20 O0gOOOOOOOO…………OOOOOOOOO……OOOOOOOOOOMOOOOOO 附图…………O O……23 OOOOO…………………………OOOOOOOOOOOOOO 附表………O O……………33 讨论…·····…································································40 结{仑···························…····……·-·····……······…··．·……．．．45 参考文献……………………………………………………………46 综述细胞因子作为DNA疫苗基因佐剂的研究进展…………………5l 致 谢·········································································．．66 个人简历…………………………………………………………………67 中文摘要 1 真核表达质粒pcDNA3／MDC—IFN—Y—VP 的构建及免疫效果研究 摘 要 B 目的：柯萨奇病毒B组3型(Coxsackievirusgrouptype3,CVB3)是引 起人类病毒性心肌炎的主要病原体。VPl是CVB3的主要衣壳蛋白，含有 几个T细胞和B细胞表位，免疫原性强，可刺激机体产生保护性的中和 抗体。但国内外研究表明，编码VPl的DNA疫苗免疫小鼠后虽然可诱导 机体产生中和抗体，但效价比较低，不能有效阻止致死量CVB3的感染。 因此，如何增强VPl基因的免疫原性，提高免疫保护作用是当前倍受关 注的问题，也是本室近几年的研究重点。 的CVB3攻击的保护率有一定程度的提高，但仍达不到实用程度。本室曾 不能有效阻止致死量病毒感染。 扰素的免疫增强作用，同时介导VPl进入APC细胞，从而促进抗原加工 的结合机率，从而增强VPl引起的免疫效应。本研究联合应用MDC和 诱导的特异性免疫应答水平和病毒攻击后免疫保护作用来观察接种后的 免疫效果。 方法： 取质粒进行酶切鉴定和测序；(3)取酶切的IFN吖片段与经过同样酶切的 中文摘要 VPl组。纯化后的质粒以生理盐水稀释后，股四头肌注射免疫小鼠，每次 眼眶静脉采血，分离血清，用微