第一章第三节蛋白质的理化性质及分类.pptVIP

(一）、维持蛋白质胶体溶液稳定的因素 （二）分离纯化蛋白质的常用方法 用物理或化学的方法破坏蛋白质分子表面的水化膜/或中和其表面电荷就可使胶体中蛋白质发生沉淀、析出这是分离纯化蛋白质的第一步。 1、盐析 在蛋白质溶液中加入大量的硫酸钠、硫酸铵、或氯化钠等，可使蛋白质表面的水化膜破坏、部分电荷被中和，蛋白质从溶液中析出，这称为盐析。 小 结 等电点 蛋白质所带电荷与溶液pH之间的关系 维持蛋白质胶体溶液稳定的因素 变性 复性 谢谢再见 (二)结合蛋白质 由蛋白质部分和非蛋白质部分结合而成. 蛋白质部分 非蛋白质部分 1,核蛋白 核酸 2,糖蛋白 糖类 3,脂蛋白 蛋白质和脂类结合 4,色蛋白 蛋白质和某些色素物质结合 5,金属蛋白 金属 6,磷蛋白 磷酸基 二、根据形状分类 1,球状蛋白质球状蛋白质分子比较对称,接近球形或椭球形.溶解度较好, 大多数蛋白质属于此类。 2,纤维蛋白质分子对称性差,类似于细棒状或纤维状.溶解性质各不相同, 如胶原蛋白, 纤维蛋白原等 三、根据功能分类 蛋 白 质 的 理 化 性 质The Physical and Chemical Characters of Protein 第 三 节 一、蛋白质的两性解离 氨基酸：两性电解质 蛋白质由氨基酸组成。蛋白质分子除两端游离的氨基和羧基可解离外，其侧链上的某些酸性基团或碱性基团，在一定的溶液pH条件下，都可解离成带负电荷或带正电荷的基团。 因此，蛋白质也是两性电解质。 蛋白质在不同PH下的解离 蛋白质解离成阳离子 兼性离子 蛋白质解离成阴离子 蛋白质的等电点( isoelectric point, pΙ) 当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。 不同蛋白质因其所含Aa 的不同而具有各自的pΙ 不同蛋白质在同一pH溶液中 电荷性质和数量不同 蛋白质分子的 大小形状各不相同 电泳分离蛋白质 二、蛋白质的胶体性质 蛋白质属于生物大分子，分子量可自1万至100万之巨，其分子的直径可达1～100nm，属于胶体物质。 其水溶液是一种比较稳定的亲水胶体溶液。 1.颗粒表面电荷：带有相同电荷，相 互排斥，不易聚集。 2.水化膜： -SH 巯基 、-CONH2 甲酰胺基等亲水性基 团，吸附水分子，在蛋白质分子表面形成 水化膜，分隔蛋白质颗粒，阻止其聚集而沉淀。 意义： ① 胶体系统有利于生命活动代谢反应 的进行； ② 是蛋白质分离纯化的基础。 常用方法：盐析、有机溶剂沉淀反应等 + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 在等电点的蛋白质 水化膜 + + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 （疏水胶体） － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 （疏水胶体） 不稳定的蛋白质颗粒 （沉淀） 酸 碱 酸 碱 酸 碱 脱水作用 脱水作用 脱水作用 2、沉淀反应 利用压力或离心力强行使水和小分子杂质通过超滤膜(一种半透膜)除去，而蛋白质留在膜上，称为超过滤(超滤)。 将蛋白质溶液放在半透膜的袋内，置于流动的适当的缓冲液（如纯水）中，小分子杂质（如硫酸铵、氧化钠等）从袋中透出，而蛋白质保留于袋中从而将蛋白质纯化，这种方法称为透析。 3、透析 透析工作图 半透膜原理 4、 超速离心 三、蛋白质的变性 概念： 在某些物理和化学因素作用下，蛋白质特定的空间构象被破坏，导致其理化性质改变和生物活性的丧失。 物理因素： 高温、高压、超声波、剧烈振荡、搅拌、X射线、紫外线； 化学因素： 强酸、强碱、尿素、胍、去污剂、重金 属盐、三氯乙酸、浓乙醇。 变性的本质： 破坏非共价键和二硫键，不破坏主 键，故蛋白质分子一级结构无变化。 变性蛋白质的特征： （1）溶解度显著减小，不溶于水。 （2）生物活性（免疫性、酶活性等）消失。 （3）粘度及分子不对称性增加，等电点有所提高。 （4）反应基团增加。由于构象改变使本来被遮蔽 的基团暴露出来，如—SH、—S—S—等。 （5）变性蛋