叶氏消渴方降血糖最佳配伍与剂量正交试验探析.docVIP

叶氏消渴方降血糖最佳配伍及剂量的正交试验分析 　　[摘要] 目的 以正交试验分析叶氏消渴方降糖最佳配伍及药量规律，探讨其对糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱的调节作用。 方法 采用高脂饲料喂养结合低剂量链脲佐菌素（STZ）腹腔注射复制大鼠糖尿病模型，按L18（37）正交表分为18组不同配伍给药组，另设模型组、二甲双胍组及空白组，共21组，每组12只。每组分别给予受试药物治疗14 d，以血糖（FBG）、血清胰岛素（Ins）、胰高血糖素（GC）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-c）、低密度脂蛋白（LDL-c）有关联的多项指标计算综合评分，对综合评分进行极差与方差分析；验证实验中，另将72只SD大鼠分为最佳组方高、中、低剂量组，模型组，二甲双胍组和空白组6个组，以同样的方法造模并检测指标。 结果 根据综合评分，叶氏消渴方最佳组方配伍主次关系为：生地知母石膏麦冬白芍甘草；最佳药量为生地30 g、知母9 g、石膏30 g、麦冬6 g、白芍9 g、甘草6 g，验证实验结果显示该方对各指标均表现出明显改善作用，除HDL-c外，其余指标与模型组比较差异有统计学意义（P AnemarrhenaasphodeloidesGypsum FibrosumOphiopogonjaponicuswhite peony rootGlycyrrhiza. The verification test showed the significant difference （P 　　[Key words] Yeshixiaokefang； Orthogonal test； Hypoglycemic； Optimal ingredient composition 叶氏消渴方为《临证指南医案》卷六“三消”中治中上焦消渴病的第一方[1]，方中诸药在现代临床治疗糖尿病亦取得良好疗效[2-7]，但在运用科学试验方法来进行配伍及剂量探讨的研究尚无。为了更好地验证叶氏消渴方的降血糖疗效，笔者拟采用正交试验结合标准差系数权重法，计算多项指标的综合评分并进行极差与方差分析，从中筛选出其最优药量配伍并验证其疗效，同时探讨该方干预糖尿病大鼠模型的最佳配伍规律及剂量的关系 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 动物 SPF级5周龄雄性SD大鼠，2批分别为252只和72只，体重160～200 g，由广西医科大学动物中心提供，合格证号：SCXK（桂）2014-0002 1.1.2 药材 方中所需石膏、知母、生地、麦冬、白芍、甘草，均购自广西中医药大学第一附属医院药学部，由广西中医药大学赛恩斯新医药学院苑敏教授鉴定，经鉴定分别为盐酸盐类矿物硬石膏族石膏（Gypsum Fibrosum）、百合科植物知母（Anemarrhena asphodeloides Bge.）的干燥根茎、百合科植物麦冬[ Ophiopogon japonicus （Linn. f.） Ker-Gawl.]的干燥块根、玄参科植物地黄（Rehmannia glutinosa Libosch.）的干燥块根、毛茛科植物芍药（Paeonia lactiflora Pall.）的干燥根、豆科植物甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch.）的干燥根，药材性状均符合2010年版《中国药典》一部规定[8] 1.1.3 试剂 链脲佐菌素（Sigma S0130，批号18883-66-4）；胆固醇（郑州利伟生物实业有限公司，批号130612）；丙硫氧嘧啶片（南通精华制药有限公司，批号131202）；血糖检测试剂盒（四川省迈克科技有限责任公司，批号0507031）；胰岛素（Ins）放射免疫分析试剂盒（天津协和医药科技有限公司，批号 130508）；胰高血糖素（GC）放射免疫分析试剂盒（天津协和医药科技有限公司，批号130508）；三酰甘油检测试剂盒（四川省迈克科技有限责任公司，批号1307021）；总胆固醇检测试剂盒（四川省迈克科技有限责任公司，批号1307031）；高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒（长春汇力生物技术有限公司，批号2013015）；低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒（长春汇力生物技术有限公司，批号2013007）；其他试剂为国产分析纯 1.1.4 仪器 TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；SN-695B型智能放免γ测量仪（上海原子核研究所日环仪器一厂）；TLXJ-IIB配套放免专用冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂） 1.2 试验方法 1.2.1 正交试验 设计结合前期实验结果及相关研究文献，同时查阅2010版《中国药典》一部，得叶氏消渴方各味药材成人常用量[8-10]：石膏15～60 g、知母6～12 g、生地12～30