精液处理室操纵请求及标准1.docVIP

精液处理室操作要求及规范 (一)、工作要求 主要负责精液的检查、稀释、保存等工作。除了工作人员，处理室不准其他人员出入，并禁止吸烟。 对采精人员送回的原精液，要及时保温、检查，凡活力低于0.7或死精超过15%以上的一律弃去不用。 保证稀释液的科学配方，个人未经场部同意，不准随意更改。稀释后的有效精子密度在35~40亿个/100毫升之间。 稀释后的精液要能保存3天，且活力无明显下降。 每天每个品种要保持一定数量的精液，以备出售和临时使用。 精液使用前，要镜检精子的活力，活力低于0.6 或死精多的不准给配种人员使用。 遇到技术员有人工授精方面的问题时，要认真、耐心，用科学的道理说服对方，不能凭直觉胡乱应付。 冰箱内严禁存放杂物和饮料。 合理使用空调，早上上班打开，下午下班关掉。 使用过的仪器、用具，如显微镜、电子天秤、密度仪等，要及时控拭、清洗，保持仪器、用具的清洁。 爱护公物，若有仪器或用具不慎损坏，要及时报告。 做好登记公猪的品种、耳号、采精时间、处理前后的密度、活力、体积、去向等工作，要保证资料的准确性和科学性，做到有检必有记录。 （二）操作规程 提前上班时间15分钟进入实验室，上班后换上拖鞋工作服进入实验室，做好采精前的准备工作： （1）打开恒温加热板，设定37℃； （2）打开水浴锅，设定39℃；打开预热箱，设定39℃。 （3）检查恒温冰箱温度是否在16~18℃；检查空调是否正常运行，设定温度17℃。 （4）配稀释液：根据需要量配制稀释液于电子称上准确称取1000ml双蒸馏水，加入一袋稀释粉（50g），放磁力搅拌器上搅拌均匀，大约需要时间10-30分钟。 （5）将稀释液放入水浴锅中，大约30min可预热到39℃。在时间补充足下，快速升温到37℃即可使用。 （6）稀释液要放置1-2小时PH值才能稳定，才可以使用。 （7）安排采精公猪（根据采精间隔和核心线种猪选配计划） （8）①将库存精液进行180°翻转使其均匀。②检查库存精子活力：每头公猪每批次随机抽样20%检查，打开输精瓶盖，用盖尖沾取适量精液滴在载玻片上，30~60mm间观察活力，活力小于60%弃去。 原精液处理： （1）接收原精对其进行实验室处理。在电子称上测定原精体积，按 1g=1ml计算。一般量150~300ml。 （2）感官检查：精子颜色乳白或灰白，气味固有的一种微腥味。 测定精子密度：开启密度仪，按照说明书进行操作。 （3）观察原精活力：用玻璃棒沾取一滴原精于载波片上，盖上盖玻片。在放大倍数为100~150倍的相差显微镜下估计活力，活力小于70%的弃去。注：每头公猪每月测定一次畸形率。废弃标准：夏季大于18%，冬季大于16%的精液废弃。 （4）计算。原精体积（ml）×密度（亿/ml）×活力÷35亿（每瓶需装有效精子35亿）＝分装瓶数。 分装瓶数×80-90ml（每瓶装80-90ml）=总体积 总体积－原精体积=需加稀释液体积 （5）测定稀释液与原精温度，两者温度一致方可稀释，最大温差为1℃。原精温度一般在35~38℃范围内。 （6）首先对原精进行1：1稀释，在采精杯中进行。后观察活力，活力有明显下降的弃去。间隔2-3min进行第二步稀释，将剩余稀释液沿杯壁缓缓注入精液中。后观察活力。 （7）马上进行分装：取出预热箱中的输精瓶，沿输精瓶壁缓慢注入精液，排出空气后旋紧盖子。 （8）将分装好的精液放在室温下，在输精瓶上用油笔表明公猪耳号和采精日期，盖上毛巾，此时即可使用，未用的精液在室温下放置1~2h 。180℃翻转后移入17℃恒温冰箱。 （9）接收下一头公猪精液，进行实验室处理。 （10）做好采精记录和取精记录。 （11）清洗器械，做好下次采精准备。 （12）根据需要随时制取蒸馏水。 （13）下班前检查实验室仪器，将剩余稀释液放入普通冰箱（2~8℃）冷藏，24h用不完弃去。 （14）清理实验室卫生。