培养基促生长实验操作.docVIP

1 目的 制订培养基灵敏度，规范、统一培养基灵敏度检测，确保微生物检测准确、安全进行。适用于所有培养基。 QC卫检组人员负责培养基的配制、灭菌、灵敏度实验。 6 内容 6.1 使用的设备、器具 生物安全柜、无菌培养皿、刻度吸管、玻璃、酒精灯等金黄色葡萄球菌ATCC 6538 大肠埃希菌ATCC 8739 铜绿假单胞菌ATCC 9027 枯草芽孢杆菌ATCC 6633 沙门氏菌ATCC 14028 白色念珠菌ATCC 10231 黑曲霉 ATCC 16404 培养基灵敏度检测所用的菌株传代次数不得超过5代 并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验用菌株的生物学特性。 上述培养物用无菌无菌无菌培养基生长促进生长促进生长促进生长促进 培养基生长促进性试验液体培养基生长促进性试验一适合培养基。在温度下，时间试验中规定的最短期限。与获得的微生物种微生物的生长明显。 固体培养基生长促进性试验采用表面法，在每一块平上接种适宜微生物。在特定温度下培养，培养时间试验中规定的最短期限。接种微生物的生长与获得的微生物相当。液体或固体培养基抑制性试验适当培养基接种至少100 CFU适宜微生物。在特定温度下培养，培养时间至少为试验中规定的最长期限。无试微生物生长。 生长促进性试验生长促进性培养基生长促进、抑制培养基 性 受试菌株 酪大豆消化生长促进≤ 3天 30-35℃ 铜绿假单胞菌≤ 3天 30-35℃ 枯草芽孢杆菌≤ 3天 30-35℃ 白色念珠菌≤ 5天 30-35℃ 黑曲霉≤ 5天 30-35℃ 酪大豆消化肉汤生长促进≤ 3天 30-35℃ 铜绿假单胞菌≤ 3天 30-35℃ 枯草芽孢杆菌≤ 3天 30-35℃ 沙氏葡萄糖琼脂 生长促进白色念珠菌≤ 5天 20-25℃ 黑曲霉≤ 5天 20-25℃ R2A 生长促进≤ 3天 30-35℃ 铜绿假单胞菌≤ 3天 30-35℃ 枯草芽孢杆菌≤ 3天 30-35℃ 大肠菌≤ 3天 30-35℃ 麦康凯肉汤 生长促进 大肠菌 ≤ 3-44℃ 抑制 金黄色葡萄球菌 ≤ 3-44℃ 麦康凯琼脂 生长促进大肠菌 ≤ 330-35℃ 氯化镁孔雀绿沙门氏菌增菌液 生长促进 沙门菌 ≤ 330-35℃ 抑制 金黄色葡萄球菌 ≤ 330-35℃ 木糖、赖氨酸、脱氧胆酸盐琼脂 生长促 沙门菌≤ 3天 30-35℃ 抑制 大肠菌 ≤ 330-35℃ 甘露醇高盐琼脂生长促进 金黄色葡萄球菌 ≤ 330-35℃ 抑制 大肠菌 ≤ 330-35℃ 微生物限度检查用培养基的灵敏度检查方法1）??用于菌数计数的半固体琼脂培养基的灵敏度检查方法a．取配制好的琼脂培养基平皿3个，在每块平板表面上用表面涂布法接种30-100个试验菌；同时用已确认的同型号培养基平皿3个做对照试验。B．等待培养基表面的菌液风干后，将培养皿倒置，于培养基的使用温度下培养48－72小时，取出培养皿点计菌落数。C．样品培养基上微生物数量应不得低于对照培养基上微生物生长数量的70％，则该培养基灵敏度视为合格。2）??用于控制菌检查的富集培养基的灵敏度检查方法参照无菌检查用培养基灵敏度检查方法进行，每100ml培养基内分别接入试验菌小于100个CFU，每个菌种接种两瓶培养基，将接过种的培养基置于指定条件下培养。应在16－18小时可明显观察到培养基内有微生物生产，则证明此培养基灵敏度合格。