人工栽培黑柄炭角菌子实体的生物活性.pdfVIP

食用菌学报@2016．23(2)：59～64 DoI：10．16488／j．cnki．1005—9873．2016．02．012 人工栽培黑柄炭角菌子实体的生物活性 李传华1，贾薇1，杨海芮2，孙太萍3，庄海宁1，陈杰4，奚利萍1，汪雯翰¨ (1上海市农业科学院食用菌研究所，农业部南方食用菌资源利用重点实验室，国家食用菌工程技术研究中心， 国家食用菌加工技术研发分中心，上海市农业遗传育种重点开放实验室，上海201403； 2石河子大学生命科学学院。新疆石河子832003；3淮阴师范学院生命科学学院，江苏淮安223300； 4盐城师范学院生命科学与技术学院，江苏盐城224000) 摘 要：从野外采集的黑耳(＆jd缸sp．)上分离到一株黑柄炭角菌(柳肠r谊ni矿fp酷)，通过人工栽培获得子实 体，对子实体水提粗多糖的体外免疫活性及有机溶剂萃取物的抗氧化和抗肿瘤活性进行测定。结果表明：黑 柄炭角菌子实体粗多糖体外刺激R—州264．7巨噬细胞分泌NO的效果不明显；石油醚萃取物具有0i·清除 oxygenspecies)并引起早期凋亡。 关键词：黑柄炭角菌；子实体；免疫活性；抗氧化；抗肿瘤 (勋肠r妇)。炭角菌属内多数种类真菌生长在土栖白蚁废弃的巢穴中，形成的菌核是一种非常名贵的 中药材，称为乌灵参，具有补气、除湿、安神镇静、造血以及提高机体免疫、治疗前列腺炎等功效[1]。但 由于野外采集的黑柄炭角菌样品量有限，单一化合物的分离纯化和相应的药理学报道较少[24]。笔者 从野外采集的黑耳上分离纯化到野生黑柄炭角菌菌株，通过人工栽培获得子实体，对子实体的提取物 进行了生物活性研究，为黑柄炭角菌的开发利用提供参考。 1材料与方法 1．1供试菌株和细胞 在西藏亚东县采集的野生黑耳(及id融sp．)子实体上通过组织分离得到菌种，经形态学、微观结构学 海市农业科学院食用菌研究所菌种保藏中心提供。 心提供。 1．2主要试剂与培养基 1640 芦丁和双氧水等均为分析纯，购于国药集团化学试剂有限公司；DMEM培养基、无酚红RMPI 培养基、RPMI acid)购 自德国CarlRDth公司；RibonucleaseA(RNase A)购自美国Fermentas公司；邻苯三酚、鲁米诺、碘化丙啶 iodide，PI)、2’，7’-Dichlorofluorescein (Pr叩idium Blue溶液购自英国AbDSemtec公司； 和5．氟尿嘧啶(Fluorouracil，5．Fu)购自美国Sigma公司；～amar AnneXin．V-FITC／PI凋亡细胞检测试剂盒购自美国BD公司。 原种培养料：76％木屑，20％玉米粉，1％玉米芯，1％麸皮，1％蔗糖，1％石膏粉，含水量60％～ 收稿日期：2016一03一04原稿；2016一05—02修改稿 基金项目：上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2014)第7．1．6号]资助 作者简介：李传华(1976一)，男，副研究员，主要从事野生菌种质资源收集、训化、栽培和利用等工作。 。本文通讯作者 E-mail：wangwenhan@saas．sh．cn 万方数据 食用菌学报 第23卷 65％，pH自然。 栽培料：75％木屑，22％玉米粉，1％玉米芯，1％石膏粉，1％红糖，含水量60％～65％。 1．3主要仪器 Bc—R2001型旋转蒸发仪，上海贝凯生物化工设备有限公司；HetoPL．3000冷冻干燥机，赛默飞世 MSC生物安全柜，美国 尔科技(中国)有限公司；cR21G高速冷冻离心机，日本Hitachi公