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中华神经外科杂志2012 年3 月第28 卷第3 期 Chin J Neurosurg. March 2012. VoL 28. No.3 .309 • ·基础论著· 小鼠 G口61 脑胶质瘤原位模型的介绍和 G口61 细胞免疫原性的初步探讨 徐铭花纬姚瑜钟乎毛颖 朱剑虹周良辅骆菲菲储以微 胶质母细胞瘤是成人最常见的原发性脑恶性肿 虫兰排除法计数活细胞数，用 PBS 制备成 1 7 瘤，近年来尽管手术、放疗、化疗都取得了一定的进 x 10 /ml G口61 单细胞悬液。 7 展，但患者预后仍很差。免疫治疗研究是胶质母细 5. 辐射灭活 GI261 疫苗的制备:取 1 x 10 /ml 胞瘤治疗研究的热点之一，需要有能够复制人胶质 GI261 单细胞悬液置于6∞ c 直线加速器照射野， 母细胞瘤特征、重复性好的胶质瘤动物模型[ll ，并 覆盖1. 5 cm 厚的组织等效填充物，照射条件:室温、 且需要了解成瘤细胞的免疫原性。本文介绍一种目 源皮距为 1∞ cm、剂量率为 1ωcGy/min ，单次照射 前应用较广泛的小鼠 G口61 脑胶质瘤原位模型，并 剂量为20 cGy ，制成辐射灭活 G口61 疫苗[2] 。 初步探讨G口61 细胞的免疫原性。 6. 小鼠G口61 脑胶质瘤原位模型组(A 组) :取 7 1 X 10 /ml G口61 单细胞悬液，保存在冰中，间歇振 材料与方法 荡j昆匀，防止细胞结块，G口61 细胞离开体外培养环 1.细胞和动物:GI261 细胞株购自美国标准生 境至种植到小鼠脑内的时间控制在90 min 之内。 物品收藏中心(ATCC);6 - 8 周龄雌性 C57Bl/6 小 取8 只 C57Bl/6 小鼠，用 0.75% 戊巴比妥饷按 鼠，购自中国科学院上海实验动物中心，饲养于复旦 50 mg/kg体质量腹腔麻醉后，刮除穿刺部位毛发并 大学实验动物楼，遵守国家《实验动物管理条例》。 消毒，立体定向仪固定小鼠头颅，纵行切开头皮，找 2. 主要试剂:DMEM 培养液、胎牛血清(美国 到前囱，穿刺点选择在前囱后 1 mm、中线右侧旁开 Gibco 公司) ，青链双抗、膜蛋白酶、锥虫兰、Evans 2 mm，垂直进针3 mm，微量泵以 2.5μνmln 的速度 5 Blue 埃文斯蓝(美国 Sigma 公司) ，兔抗小鼠 GFAP 推注
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