水中隐孢子虫的检测与活性鉴定.pdfVIP

+ 0@7F?6? T5K1FBC 5P U?4?17FB12 (M7?FM? BF8 ?M@F5C5L2! U5C* ,,! V5* +! ’$$, 水中隐孢子虫的检测与活性鉴定 肖淑敏，李国清，朱兴全 （华南农业大学 兽医学院，广东广州! #$%’ ） ! ! ! ! ! ! 中图分类号：( )’ * +’,! ! 文献标识码：-! ! 文章编号：#$$$.% #/ （’$$, ）$+.$$+ .$% ! ! 隐孢子虫病（01234563517875676 ）是一种全球性流 不同，如棉质、尼龙、人造纤维滤筒比常用的聚丙二 行的人兽共患原虫病，由寄生于人和动物肠道的隐 醇脂滤器潴留效果稍好；而同种材料的滤筒也因其 孢子虫（!#$ %’$ ()(*+ 63* ）所引起。该病的主要 孔径的不同而不同，如孔径$ * !D 比#* $ !D 更佳。 ［% ］ 症状为腹泻，在免疫功能健全者，这种腹泻表现为自 而(@?3@?18 等 建议滤筒孔径以’ !D 、滤速以#* 限性过程，一般在+ 9 #$ 8 后自愈；而在免疫功能不 E D7F 为宜，过滤后用3G % * $ 9 + * 的洗脱液洗脱 全者，尤其是爱滋病患者，则表现为持续性腹泻，甚 滤筒上潴留的卵囊，以人工洗脱’ 次为佳。洗脱液 ［#］ 离心过程最易损失卵囊，提高离心力可以减少卵囊 至威胁生命 。隐孢子虫卵囊极其微小，常随宿主 粪便排出体外，污染水源。近年来，由于不断发生水 损失，常用 $$$ H , 离心#$ D7F ；圆锥型底比平底型 ［+ ］ 源性隐孢子虫病的暴发流行，所以水中隐孢子虫卵 离心管效果更好。(B14512 等 报道，用多层网状泡 囊的污染及其检测问题倍受关注。美国疾病控制和 沫盘的过滤装置不管加样是自来水还是河水，其卵 预防中心（0:0 ）把它作为一种新的高传染性疾病 囊回收率高达/$I 。多层网状泡沫盘在压力作用 来防治。我国对环境水样中隐孢子虫的研究报道较 下孔径变小，像滤筒一样可以潴留隐孢子虫卵囊，而 ［’ ］ ［, ］ 过滤后解除压力时孔径恢复至原来大小，很易洗脱 少，除澳门 、台湾 外，尚未见到检测水中隐孢子 虫的报道。 潴留的卵囊。 #* #* ’! 膜溶解法! 用过滤法浓集水样中的隐孢子 ! 水中隐孢子虫的检测 虫卵囊，因卵囊黏附作用而难以洗脱，影响卵囊的回 自从’$ 世纪)$ 年代第# 次水源性隐孢子虫病 收；过滤膜溶解法则是直接将过滤膜用丙酮溶解，避 暴发以来，相继建立了水中隐孢子虫卵囊的各种检 免了洗脱过程中丢失卵囊。如用醋酸纤维滤膜过滤 测方法。主要包括, 个步骤：卵囊的浓集；卵囊的纯 水样，滤膜用丙酮溶解后离心，对沉淀先后用+$$ 化；卵囊的检测与计数。 DE 酒精和J-( 各离心洗涤 # 次，再用免疫磁性 !* ! 卵囊的浓集 分离法（7DDKF5DBLF?47M 6?3B1B475F ，N=( ）纯化，这是 #* #* #! 过滤法! 最初采用过滤筒和过滤膜从水样 日本监测环境水样隐孢子虫的标准方法［) ］。 中浓集隐孢子虫卵囊，然后用洗脱液洗脱潴留于滤