三七的18SrRNA,matK基因序列和HPLC化学指纹图谱分析研究.pdfVIP

维普资讯 药品评价 2005年 第 2卷 第 1期 一 23一 · 论 著 · 三七的18SrRNA，matK基因序列和HPLC化学指纹图谱分析 研究 张 英 12黄明辉 2,3 柏干荣2,3 杨梦苏2,3 曹 晖1,4 (1中国中医研究院中药研 究所 ，北京，100700；2香港城 市大学深圳研 究院生物医药科技中心，深圳 ，518057；3香港城市大 学生物及化学系．香港特别行政 区；4国家中药现代化工程技术研究中心，珠海，519020) f摘要】 目的 分析中药三七Panaxnotoginseng的 18SrRNA和matK基 因的分子特征和三七的化学指纹特 征．为三七的正品药材基原鉴定提供分子和化学依据。 方法 采用 PCR直接测序技术测定三七及其7种伪 品的18SrRNA和matK基因部分核苷酸序列 以及不同产地三七的DNA分子特征。利用HPLC的化学分析技 术．明确产地对三七化学成分的影响．以及三七不同部位的化学指纹特征。 结果 (1)三七及其7种常见伪 品的核糖体 18SrRNA基因序列存在很大的差异。(2)不同产地的三七的核糖体 18SrRNA和叶绿体 matK基因 序列特征完全一致 ．分别与GenBank上已报道的R1型 85171)和Ml~(AB027526)序列吻合 。(3)不同产地的 三七HPLC指纹图谱相似。(4)三七不 同部位均具有其相对稳定的HPLC指纹特征，其中花、叶具有特有 的指纹 区．根、须根、剪 13、筋条等不同商品规格的HPLC指纹图谱比较相似。 结论 基因序列标记能从分子水平定 性分辨三七及其伪品的遗传背景差异．为 中药品种标准化提供了先进可行、稳定可靠 的分子标准 ：HPIE指纹 图谱分析可以直观地为三七的化学成分定性 ．三七不同商品规格的特征性指纹有望成为 以其为原材料 的各种 产品的质控标准 ．而三七不同部位 (尤其是花和叶)的HPLC指纹图谱将有望成为制定三七花、三七叶新药用资 源质控标准的依据。 [关键词】三七；基因序列；指纹图谱；中药鉴定；高效液相色谱 【中图分类号】R917 文【献标识码】A 文【章编号】1672—2809(2005)01—0023—07 Studyonmolecularand chemicalidentifiaction ofPanaxnotoginsengby 18SrRNA gene andmatK genesequencingandbyHPLC fingerprinting ZhangYing。HuangMinghuiz3,BoGanrongi，eta1．(、1InstituteofMaterialMedica。ChinaAcade． myofTraditionalChineseMedicine，Beijing,1O0700；2DepartmentofBoilogyandChemistry，City UniversityofHongKong,HongKong；3NatoinalEngineeringTechnoloyg ResearchCenterof ModernTraditoinalChineseMedicine，Zhuhai，519020) AbstractObjectiveToidentifytheoriginoffamousSanqi(Panaxnotoginseng)onthebasis0fits sequenceofnuclear18SrRNA andchloroplastgenesandchemicalfingerprint ． Method Applying molecularapproachessuchasPCRamplificationandsequencingofnuclear18SrRNA andchl0r0一 plastgenestoidenti~Panaxnot