酶促吉西他滨乙酰化反应的研究.pdfVIP

第40卷，第4期 安 徽 化 工 Vo1．40，No．4 2014年 8月 ANHUICHEMICAL INDUSTRY Aug．2014 酶促吉西他滨乙酰化反应的研究 罗成 ，王 淮 一，姚 日生 1l2，惠兰兰 (1．合肥工业大学医学工程学院制药工程系，安徽合肥230009； 2_农产品生物化工教育部工程研究中心，安徽合肥230009) 摘要：探讨了八种不同来源水解酶催化吉西他滨乙酰化反应的催化活性，结果发现 ，有四种脂肪酶能够催化该酰化反应 ，且它们的产物 只有一种，其中脂肪酶Novozyme435的催化活性最高。此外，通过 C—NMR和MS等技术手段对酶促反应产物的结构进行鉴定，发现它 们以催化吉西他滨 5’一羟基酰化反应为主，且反应选择性均高于99％。 关键词：吉西他滨；区域选择性；酶促酰化反应 doi：10．3969~．issn．1008—553X．2014．04．012 中图分类号：R979．1 文献标识码：A 文章编号 ：1008—553X(2014)04—0036—04 1引言 们尝试通过对其结构进行修饰，以获得具有更高药效的 吉西他滨(Gemcitabine)是一类非天然核苷，属于脱 新药 。 氧胞嘧啶核苷类似物。它是细胞周期特异性抗肿瘤药 ， 早在20世纪70年代末，人们就已发现吉西他滨酯 不仅可以杀伤处于S期(DNA合成)的细胞，还可以阻断 类衍生物比吉西他滨具有更高的药效活性。吉西他滨酯 细胞增殖 由Gl向S期过渡的进程；另外，它还是一种抗 类衍生物是通过酰化反应将一分子的疏水性基团连接 代谢药物，需要通过脱氧胞苷激酶磷酸化作用来激活， 到其嘧啶环4一氨基或糖基侧链 3’一羟基、5’一羟基上而 并能通过脱氧胞苷脱氨酶使其失活生成 2,2一二氟脱氧 得，其脂溶性大大提高 ，从而在体内更易进行跨膜运输， 尿苷。在它的活性形式中，2，2一脱氧胞苷三磷酸能与 迅速到达病灶并得到有效积累防Ⅷ。此外，吉西他滨酯类 DNA结合，通过抑制DNA聚合酶阻止 DNA的合成，以 衍生物还有利于使用药物载体的包埋，其抗癌药效也优 达到抑制肿瘤细胞的功效l1．3；它还具有很高的抗实体肿 于母药，在较小剂量下(比母药用量减低 3～5倍)即可 瘤活性，为非小细胞肺癌(NSCLC)的一线治疗药物和胰 获得同样效果，故能有效减轻化疗的副作用[11,121。 腺癌的最佳治疗药物 4【j_。 自从报道吉西他滨酯类衍生物比吉西他滨具有更 但其在临床应用中尚存在水溶性较强 ，半衰期短， 好的抗肿瘤活性 ，有关化学法合成吉西他滨衍生物的研 __弋弋＼＼zz 血浆会快速转化为胞苷类非活性代谢物等缺点 ，使得 究报道相继出现。目前，化学法合成吉西他滨衍生物主 吉西他滨在临床上的应用受到了极大的限制，因此学者 要包括基团保护法和直接酰化法。前者需要进行基团保 CH3COOCH=CH2 CH3CHO H0 一 上 。 Enzyme OH F 图1酶促吉西他滨与羧酸乙