应用全细胞蛋白SDS-PAGE分子标记技术验证含羞草根瘤菌.PDFVIP

应用与环境生物学报 2009，15 ( 5 ): 719~723 2009-10-25 Chin J Appl Environ Biol=ISSN 1006-687X DOI: 10.3724/SP.J.1145.2009.00719 应用全细胞蛋白SDS分子标记技术验证 含羞草根瘤菌的结瘤能力* 刘晓云1** 张 斌2 吴 伟3 李乔仙4 (1河北大学生命科学学院，河北省微生物多样性研究与应用实验室 保定 071002) (2西南林学院资源学院，西南地区生物多样性保育国家林业局重点实验室 昆明 650224) (3西南林学院保护生物学院 昆明 650224) (4云南省草地动物科学研究院 昆明 650212) 摘 要 对云南省热带及亚热带地区的含羞草根瘤菌进行了分离，选择其中40株菌为接种菌株，通过结瘤试验并采用 全细胞蛋白SDS分子标记方法研究了其结瘤能力. 经过结瘤试验，发现除菌株SWF66075和SWF66093没有结瘤 外，其它38株菌株均与含羞草植物结瘤，结瘤率为95%. 从结瘤试验所获根瘤中，分离得到结瘤菌株，采用全细胞蛋白 SDS分子标记对结瘤菌株与接种菌株进行了比较研究. 蛋白图谱及聚类分析显示，26株接种菌株与其结瘤菌株 的全细胞蛋白分子图谱完全相同，在100%的相似水平上与其结瘤菌株聚在一起，说明宿主植物所形成的根瘤确系接 种菌株侵入所致，因而可将这些菌株确认为根瘤菌菌株；而SWF66012、SWF66029、SWF66044和SWF66058等12株菌 株的结瘤菌株与其各自接种菌株的全细胞蛋白图谱存在较大差异，推测这12株接种菌株与其结瘤菌株可能不是同一 菌株，尚不能确定它们与含羞草植物的结瘤能力，这些菌株是否为根瘤菌菌株仍需进一步验证. 研究结果表明，全细 胞蛋白SDS分子标记技术是一种快速、准确地验证根瘤菌结瘤能力的方法. 该方法进一步完善了结瘤试验，并 初步揭示了根瘤菌的竞争结瘤能力，适用于对大量根瘤内分离菌株进行根瘤菌的证实研究. 图2 参28 关键词 含羞草；根瘤菌；分子标记；全细胞蛋白；SDS CLC S154.381 Verification of Nodulation Ability of Strains Isolated fromMimosa spp. Nodules Using Whole Cell Protein SDSMolecular Marker Method* LIU Xiaoyun1**, ZHANG Bin2, WU Wei3 LI Qiaoxian4 (1College of Life Sciences, Hebei University, Key Laboratory of Microbial Diversity Research and Application of Hebei Province, Baoding 071002, Hebei, China) (2College of Resources, Southwest Forestry College, Key Laboratory of Biodiversity Conservation in Southwest China of State Forestry Administration, Kunming 650224, C