欧拉羊胚肾细胞的分离培养和鉴定.pdfVIP

安徽农 业科学 。?????????????????．???．????。?????：???— ???，???? 责任编辑 刘赘? 责任校对 傅 真治? 欧拉 羊胚 肾细胞 的分 离 培 养和 鉴定? 乔自林? ，李明生?，冯若飞?，令世鑫?，王家敏?，沈武玲?，冯玉萍?，柏家林?，马忠仁? ??．甘肃省动物细胞工程技术研究 中心 ，甘肃兰州 ??????；?．西北民族大学生命科学与工程学院 ，甘肃 兰州 ???????? 摘要 ?目的?分离培养并鉴定欧拉羊胚肾细胞，为该品种基 因组文库构建和遗传多样性研 究提供生物学材料。?方法?用胰蛋白酶热? 消化法分离并培养欧拉羊胚肾原代细胞，通过差速消化和差速贴壁法纯化成纤维细胞，扩大培养至第?代用液氮保存 ，细胞复苏后进行? 活力、形态、生长曲线、微生物污染检测和连续传代培养试验。?结果?欧拉羊胚肾细胞呈成纤维型，复苏活力 ??％以上，生长良好 ，生长? 曲线呈“?”，最 大增 殖浓度为 ?．??×???／??，倍 增 时 间 ????；细菌 、真菌 、病 毒 、支原 体检 测 呈 阴性 ，连 续传 代 培养在 ??代 内生长 正 常。? ?结论 ?欧拉羊胚 肾细胞分 离培 养成功 ，使 这一重要种 质资源在 细胞 水平上得 以保存 。? 关键词 欧拉羊 ；胚 肾细胞 ；培养 ；鉴 定? 中图分类号 ????．?—?? 文献标识码 ?? 文章编 号 ????— ????????????— ?????— ??? ??????????。??????????????????????????????????????????????????????????????? ???????．?????????? ??????????????????????????????????????????????????，???????，?????????????? ????????? 『?????????????????????????????????????，?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????—? ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????．『????????? ???????????????????????????????????????????? ???????????????????????????????????????????? ?????????????????????．??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????．? ???????????????????????—? ??????．?????????????????????????????．??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????????????．『?????????? ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????