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小鼠海马神经元急性分离和膜片钳技术的应用_李刚
第 41 卷 第 10 期 天 津 大 学 学 报 Vol.41 No.10 2008 年 10 月 Journal of Tianjin University Oct. 2008 小鼠海马神经元急性分离和膜片钳技术的应用 李 刚，程立君，林 凌，贾方荣 （天津大学天津市生物医学检测技术与仪器重点实验室，天津 300072） 摘 要：为了获得适用于膜片钳实验技术的单个海马神经元，应用酶消化及机械分离法，急性分离出生 10～13 d 的昆 明小鼠得到单个海马神经元．通过倒置显微镜直接观察和全细胞膜片钳技术分别对分离得到的海马细胞的形态学和 电生理学特征进行研究．通过实验可得，急性分离所得活性较好的海马神经元胞体具有锥形胞体和顶树突特征，立体 感强．在全细胞膜片钳记录模式下可记录到全细胞电流及钠、钾通道电流．由实验结果可知，该方法可以得到形态和 生理特征良好的单个海马神经元，证实该方法适用于膜片钳技术的研究，对深入探讨药物、物理因子等对海马离子通 道及信号转导机制的作用有重要的应用价值． 关键词：海马；急性分离；神经元；膜片钳技术；离子通道 中图分类号：R421；Ｑ424 文献标志码：A 文章编号：0493-2137（2008）10-1157-05 Acute Isolation of Hippocampal Neurons of Neonate Mice and Application of Patch-Clamp Technique LI Gang，CHENG Li-jun，LIN Ling，JIA Fang-rong （Tianjin Key Laboratory of Biomedical Detecting Techniques and Instruments， Tianjin University，Tianjin 300072，China） Abstract：To gain a single hippocampal neuron suitable for patch-clamp technique，acute isolation of hippocampal neurons of 10—13-d-old Kunming mouse was obtained by enzyme digestion and mechanical separation technique. With the direct observation by inverted microscope and whole-cell patch-clamp technique, the morphology and electrophysiology characteristics of hippocampal cells were investigated respectively. The experimental results show that hippocampal neurons with better activity obtained by acute isolation are of cone-
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