仪器分析第十章：色谱法导论.ppt

第十章 色谱法概论;目的要求;第一节 概述 色谱法也叫层析法，它是一种高效能的和应用最广的物理或物理化学分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。 ;一、色谱法的起源和发展; 此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。 ; 胡萝卜素 叶黄素 叶绿素 ;柱 色 谱 实 验 装 置;20世纪30年代 离子交换色谱建立 1931年 库恩 奥地利化学家 胡萝卜素植物色素分离 40年代 Tiselius 吸附色谱与电泳 Martin 分配色谱、纸色谱和薄层色谱技术 50年代 Martin Synge 气-液色谱法 提出塔板理论 Van Deemter 提出速率理论 Golay 发明高效毛细管柱气相色谱 60年代 Horvathe 高效液相色谱法建立 80年代 离子色谱、超临界流体色谱、高效毛细管电泳、场流动分级分离; Tiselius, A.W.K. Martin, A.J.P. Synge, R.L.M. 1948年 Nobel 化学奖 1952年 Nobel 化学奖 吸附色谱与电泳 分配色谱及塔板理论; 现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。我们仍然叫它色谱分析。; 二、色谱分离基本原理; 由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 ; 三、色谱法的分类;;㈡ 按分离机理分类;㈢ 按操作形式分类;(1)纸色谱法: 利用滤纸作载体，吸附在纸上的水作固定相，样品点在滤纸一端，用流动相展开进行分离的色谱方法。 (2)薄层色谱法: 将固体吸附剂在玻璃板或塑料板上制成薄层作固定相，采用与纸色谱类似的操作进行分离的色谱方法。 (3)薄膜色谱法: 将分子固定???制成薄膜，采用与纸色谱类似的操作方法。;;图示;色谱法;回忆;第二节 色谱流出曲线（色谱图） 及有关概念 一、色谱法分离的过程 分离过程（以分离A、B两组分为例）为： ;混合组分的分离过程及检测器对各组分在不同阶段的响应 ;;二、色谱流出曲线; 如图所示为一色谱流出曲线：;三、基本概念; 3.保留值 死时间 保留时间 保留时间 调整保留时间 保留值 死体积 保留体积 保留体积 调整保留体积 相对保留值; (1)保留时间;c. 调整保留时间tR′ ： 某组分的保留时间扣除死时间后的保留时间，它是组分在固定相中的滞留时间。即 tR′ ＝tR－tM 保留时间为色谱定性依据。但同一组分的保留时间与流速有关，因此有时需用保留体积来表示保留值。 ; (2)保留体积 a. 死体积VM ：色谱柱管内固定相颗粒间空隙、色谱仪管路和连接头间空隙和检测器间隙的总和。忽略后两项可得到： VM＝tM ·FC FC — 流动相流速 ;其中，Fc为柱出口的流动相流速 （mL/min)，其值为：; b. 保留体积VR：指从进样到待测物在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相的体积。;(3)相对保留值 相对保留值r2,1：组分2的调整保留值与组分1 的调整保留值之比。;注意：r2,1只与柱温和固定相性质有关，而与柱内径、柱长L、填充情况及流动相流速无关，因此，在色谱分析中，尤其是GC中广泛用于定性的依据！ 具体做法：固定一个色谱峰为标