2013实验五原虫1.pptVIP

* 实验五　医学原虫（一）Medical Protozoan 溶组织内阿米巴(Entamoeba histolytica) 其它阿米巴 * 实验目的和要求 1.掌握溶组织内阿米巴滋养体和包囊的形态特点。 2.掌握溶组织内阿米巴常用诊断方法。 3.掌握溶组织内阿米巴与结肠阿米巴形态鉴别要点。 4.理解溶组织内阿米巴的致病作用。 * 实验内容 一、油镜的使用及清洁 二、操作 1.溶组织内阿米巴滋养体(trophozoite)（油镜） 2.溶组织内阿米巴包囊(cyst)（油镜） 3.阿米巴活滋养体观察及包囊碘染色观察 （高倍镜） 三、小组操作 鼠疟原虫接种实验 四、示教 溶组织内阿米巴肠病理标本（火山口样，烧瓶状）、结肠内阿米巴滋养体和包囊，其他非致病阿米巴 五、作业 六、 小结 * 油镜的使用及清洁 使用:见P2 1.加一滴油在玻片标本上。 2.对焦：把显微镜的物镜调至与标本最小距离，再转动微调 （拉开标本与物镜的距离），调至焦距清楚为止。 清洁: 镜头的清洁 1.用擦镜纸（白色）擦干净镜头上的油（1-2次） 2.用沾有二甲苯的擦镜纸轻擦镜头(2-3次) 3.用擦镜纸擦(1-2次) 标本的清洁 1.用黄色纸覆盖在油滴上，拖(擦)去油（1-2次） 2.用另一张黄色纸覆盖在标本上，滴1-2滴二甲 苯，拖(擦) 2-3次。 3.用黄色纸拖(擦)(1-2次) 注意：1.有盖玻片封片的标本用“擦“，没封片的标本用“拖”。 2.用过的擦镜纸和擦玻片纸请放在桌面的烧杯里。 * 1.内外质分明 2.核一个。 　核仁一个，常居中。 　核周染色质较均匀。 3.通常有吞噬的RBC 溶组织内阿米巴滋养体 * 溶组织内阿米巴滋养体(含红细胞) 红细胞 细胞核 * 溶组织内阿米巴滋养体（不含红细胞） * 1.核的特点同滋养体 2.细胞核数1-4个, 感染期为4个 3.拟染色体深蓝色，棒 状，两端较钝圆。成熟 包囊常缺拟染色体。 4.未成熟包囊常有糖原泡 溶组织内阿米巴包囊 * 糖原泡 拟染色体 单核包囊 双核包囊 成熟包囊 * 1.内外质不分明。 2.核一个。 核仁一个，常偏位。 核周染色质分布不均匀。 3.没有吞噬的RBC 细胞核 核仁 核周染色质 结肠内阿米巴滋养体 * 1.核的特点同滋养体。 2.细胞核数1-8个，感染期 为8个。 3.拟染色体深蓝色，两端 不整齐，似碎片状或草 束状。成熟包囊常缺拟 染色体。 结肠内阿米巴包囊 * 溶组织内阿米巴与结肠内阿米巴形态特点及区别 溶组织内阿米巴 结肠内阿米巴 滋养体 1.较右小，内外质分明 2.核一个。 核仁一个，居中。 核周染色质较均匀。 3.通常有吞噬的RBC 1.较左大，内外质分界不甚显 2.核一个。 核仁一个，较大，偏位。 核周 染色颗粒较粗大，大 小及分布不均。 3.无RBC，吞噬细菌、淀粉 包囊 1.较小 2.核的特点同滋养体 3.细胞核数1-4个,感染期为4个 4.拟染色体深蓝色，棒状，两 端较钝圆。成熟包囊常缺拟 染色体。 ? 1.较大 2.核的特点同滋养体 3.细胞核数1-8个,感染期为8个 4.拟染色体的两端不整齐似碎 片状或草束状。 * 阿米巴活滋养体观察及包囊碘染色观察（高倍镜） 包囊碘染色后呈棕黄色，囊壁不着色，发亮，核呈小圆圈状，未成熟包囊中可见清晰的棕色糖原泡，拟染色体发亮。 碘染液 活滋养体观察 包囊碘染色观察 含阿米巴的培养液 * 包囊碘染色 包囊碘染色后呈棕黄色，囊壁不着色，发亮，核呈小圆圈状，未成熟包囊中可见清晰的棕色糖原泡，拟染色体发亮。 * 口小底大的烧瓶样溃疡 * 鼠疟原虫（伯氏疟原虫，Plasmodium berghei)接种实验(P17) 小组操作:4人/组 方法： 1.从阳性鼠尾巴取血2滴，用生理盐水稀释至2ml 2.每鼠从腹腔注入0.1ml稀释的含原虫血液（注射部位需消毒　） 3.标记小鼠（用苦味酸标记） 4.一周后采血涂片检查 注：在鼠笼上贴上注明接种感染的日期和班别的标签。（已做） 1 2 3 4 5 10 小鼠背面观 小鼠腹面观 标记小鼠 接种小鼠 接种部位 * 如何抓取小鼠？ 先用右手抓住鼠尾提起，置于鼠笼或实验台上，用左手的拇指、食指和中指抓住小鼠两耳后项背部皮毛，以无名指及小指夹住鼠尾即可。 先 * 小结 一、原虫的结构特点 单细胞　　 　胞膜(质膜) 胞质(基质、细胞器、内含物） 　细胞