一轮复习生物课件-DNA重组技术的基本工具（共20张PPT）.pptVIP

什么是目的基因？简单地说就是我们所需要的那个基因，培育转基因生物所需要的那个基因。比如说培育抗虫棉，目的基因就是毒蛋白基因，那什么是受体细胞？比如培育抗虫棉，我们用到的受体细胞就是棉花细胞，也就是说想改造哪种生物的性状，哪种生物的细胞就叫受体细胞。 什么是质粒？看图，实际是一个小型环状DNA，蓝颜色的DNA是拟核中的 DNA，在细胞质中有小圈，放大看就是环状的DNA 复制原点，即质粒可在受体细胞中自我复制，所以若把目的基因插进来，则目的基因可跟着复制。这个位点，目的基因插入位点实际上就是限制酶的切割位点，限制酶在这里切开一口，然后把目的基因插入进来，从第2个条件可看出，质粒最好有多种限制酶的切割位点，就能把多种外源基因插进去，而且最好是单一切点？为什么？如果有多个切割位点，同种限制酶 可在这些位点同时切下去，就会把中间的片段切掉，如果刚好复制原点在这个片段里面，就无法复制了。所以、、、另外，这个区域是一个标记基因 DNA自身环化 DNA片段连接后环化 专题一 基因工程 一、什么是基因工程 概念： 基因工程，又叫基因拼接技术或DNA重组技术。就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 （1）操作对象： （2）操作水平（研究水平）： （3）目的（优势）： （4）原理： 基因 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状 基因重组 抗虫棉的培育 苏云金杆菌 毒蛋白基因 毒蛋白 杀死害虫 棉花细胞 一、DNA重组技术的基本工具 准确切割DNA的工具（“基因剪刀”） ——限制酶 DNA片段的连接工具（“基因针线”） ——DNA连接酶 基因转移工具 ——运载体 工具酶 一、限制性核酸内切酶（限制酶）——“分子手术刀” （2）作用： 识别特定核苷酸序列，切割特定DNA切点 （3）特点： 专一性 注意：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。 （1）来源： 主要是从原核生物中分离纯化出来的 如：大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 限制酶 被限制酶切开的DNA两条链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 限制酶 限制酶切割的是什么？ A T A T T A G C G G C G C A T C DNA分子 磷酸二酯键 切割的是DNA分子两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键 C T T A A G A A T T C G 黏性末端 黏性末端 G G G C C C 平末端 平末端 G G G C C C （4）结果：两种类型的末端 中轴线 切割DNA分子后形成什么？ 从中轴线两侧切DNA 从中轴线处切 DNA 思考： 1、同一种限制酶作用于不同的DNA分子产生的末端相同吗？ 2、限制酶存在于原核生物中的作用是什么？ 切断外源DNA，使之失效，从而保护自身 相同 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 DNA连接酶连接的是什么？ 将双链DNA分子片段“缝合”起来，恢复两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 二、DNA连接酶——“分子缝合针” A A A T T T G C G C C A G T T A 磷酸二酯键 磷酸二酯键 思考： 1、DNA聚合酶和DNA连接酶有什么异同？ 比较项目 DNA连接酶 DNA聚合酶 不同点 作用对象 作用条件 相同点 作用部位 连接DNA片段 连接游离的脱氧核苷酸 不需要模板 需要模板 连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖（形成磷酸二酯键） （2）种类： 根据酶的来源不同分两类： ‘ E.Coli DNA连接酶：连接黏性末端 T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端 三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” （1）作用： 将目的基因送入受体细胞 （2）常用的运载体： 质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等 1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2.具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 3.具有某些标记基因，便于进行筛选。 如抗生素的抗性基因、产物具有颜色