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年第 期 中国种业 专题论述 !# ! ! 种子检测技术研究进展 于继洲 韩红艳 郭 艳 ! 山西农业大学园艺学院，太谷 H/HIH )% 摘要：本文较系统地对目前国内外种子检测方法进行了评 植物的23’ 不同部位具有多态性，这些部位专一碱基 述，重点介绍了三种方法，即种子纯度鉴定方法、种子活力测定方 序可被限制性内切酶所识别。此法主要在医学应用，近 法和种子病原菌检测方法，并对种子检测技术进展进行了述评。 年来发展到植物中，不足之处是费用昂贵；单克隆抗体 关键词：种子；纯度；病原菌；检测；进展 法是根据蛋白质与其抗体之间免疫反应专一性来鉴别 不同遗传性的种子。基本方法是电泳分离种子蛋白，纯 加强种子质量检验，保证种子质量是目前我国种 化某一品种专一的种子蛋白组分。从免疫动物脾脏中 业中急待解决的问题。本文就种子检测技术进展进行 分离出能合成抗体的淋巴细胞分别培养为细胞株，筛 了述评，为广大种子生产者及经营者确保种子质量提 选出合成该专一蛋白的细胞株，大量繁殖得到有能量 供参考。 的单克隆抗体，用此单克隆抗体处理硝酸纤维素膜，将 种子纯度鉴定 待鉴定的种子蛋白液直接点在这种硝酸纤维膜上，经 # 电泳法 电泳法发展较快、应用广、准确度高， 酶标第二抗体处理，酶染色即显示专一蛋白带。此种方 已成为种子纯度鉴定的主要技术之一。电泳法最初采 法不足之处是单克隆抗体细胞株筛选繁琐，但一经筛 用淀粉凝胶电泳 ! #$ % ，近年才发展到利用聚丙烯酰 选成功，即可快速、方便鉴定种子纯度。 胺凝胶电泳! ’#$ % ( )* 。最近，等电聚焦! +$, % 电泳技术 ! 种子活力测定 又得到迅速发展。聚丙烯酰胺凝胶电泳是将从种子中 种子活力是种子质量的一个综合指标，由于各种 提取的醇溶蛋白在-. 为/0 1 条件下进行分离，产生 类型种子其单粒重、种皮厚度、发芽速度差异较大( 1 * ， 的蛋白质条带与遗传基因有关，即蛋白指纹，由单粒种 测定方法主要有以下几种。 子所产生的指纹可鉴定品种的真实性和纯度。等电聚 % !# 外部形态法 目测法 根据种子的特点，观察 焦电泳法是用等电聚焦电泳分离种子蛋白的印渍来鉴 其饱满度、色泽、气味、千粒重等。颗粒饱满、千粒重大、 定品种纯度的一条新途径。将非变性等电聚焦电泳凝 外观色泽光亮，呈现其固有色泽、无异味，胚呈乳白色， 胶分离种子蛋白酶，然后将这些电泳分离出来的种子 一般为活力强的种子。 蛋白吸附在可移动的膜上形成印渍。一次电泳即可进 !# ! ’ 光放射显影法 以E;B1 等重金属盐溶液浸 行多种酶的染色分析。分辨率高、操作简单、信息量 种，利用细胞膜活力与渗透强度的相关关系测定。活力 大，是较好的分析方法。 低的种子细胞不完整，重金属溶液易渗入，渗入后经F # ! 高效液相色谱法 电泳技术在多种作物纯度检 光照射、显影后，形成黑色图象，而活力高的种子，图像 测中得到广泛应用，但对于那些品种亲缘关系