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关于摄食海参皂苷对肥胖小鼠血压造成的影响 　　海参是我国著名的海珍品，也是传统的药食同源的海洋食品，位居海八珍之首，具有多种营养保健功效。海参皂苷(saponinofseacucumber，SSC)是棘皮动物海参的主要特征性代谢产物，有抗真菌、抗病毒、细胞毒活性、免疫调节等广泛的药理活性。近年来对海参皂苷的研究逐渐增多，海参皂苷的多种药理学作用得到证实。目前，国内外关于皂苷降血压的研究主要集中于植物来源的皂苷，如陈明等对SHR大鼠灌胃低、中高浓度的无患子皂苷，发现中、高浓度皂苷具有持续降压效果;陆益红等发现人参总皂苷灌胃SHR大鼠能产生稍逊于相同剂量卡托普利的降压效果;Turova等报道静脉注射高纯度人参皂苷能够降低家兔血压。海参皂苷结构明显不同于人参等植物源性皂苷，而关于海参皂苷的报道鲜有。高血压是一种常见的心血管系统疾病。目前我国高血压患病人数已超过1亿，并以每年500万人的速度增加。体重超重、膳食高盐、中度以上饮酒是高血压病发病的三大危险因素。其中，绝大多数为原因不明的原发性高血压，体重超重和肥胖作为原发性高血压的第一危险因素，日益引起人们的关注。目前，人们已在动物身上建立了多种动物高血压模型，常用的模型一般有两类，一类是通过对肾脏进行手术，造成肾源性高血压;另一类是自发性SHR大鼠，其更接近于家族性高血压的人群。本实验中采用的db/db小鼠是一类瘦素受体突变的自发性肥胖小鼠，食欲旺盛、极度肥胖，且伴随肥胖血压升高，其特征更接近于肥胖的高血压人群。本实验通过观察海参皂苷对db/db小鼠血压的影响，初步探讨海参皂苷对肥胖小鼠的降压机制，为其作为海洋药物原料提供科学依据。 　　1　材料与方法 　　1.1　材料、试剂与仪器 　　海参皂苷以菲律宾刺参为原料，按照董平等[8]的方法制备，其纯度经HPLC法测定达91%。C57BL/KsJ(db/db)小鼠合计24只，SPF级，♂，体质量20～25g;C57BL/KsJ作为正常对照，共5只，SPF级，♂，体质量15～20g，购自南京青紫兰科技有限公司。小动物无创血压测定系统，CODA2Channels型，美国KentScientific公司;UltraTrurraxT18Basic型高速匀浆机，德国Ika公司;iQ5型RealtimePCR仪，美国BioRad公司。 　　1.2　方法 　　1.2.1　动物分组及饲料配制 　　24只C57BL/KsJ(db/db)小鼠经适应性喂养1周后，按体质量随机分为模型组、海参皂苷低剂量组和海参皂苷高剂量组，每组8只;并以5只C57BL/KsJ作为正常对照组。其中，对照组和模型组均喂食基础饲料，海参皂苷低、高剂量组在基础饲料的基础上分别添加02g·kg-1的海参皂苷和04g·kg-1的海参皂苷。 　　1.2.2　动物实验 　　动物放入钢丝笼内单只饲喂，室温(23plusmn;2)℃，12∶12h明暗交替，自由摄食和饮水，连续喂养6周。分别于第3周和第6周进行血压测定。末次喂食后，禁食不禁水10h，眼球取血处死，取肾脏于-80℃保存，用于提取RNA。 　　1.2.3　血压测定 　　参照小动物无创血压仪说明书，使用尾袖套法无创血压系统测量小鼠尾动脉血压，测定前1周，每日使小鼠进入套筒适应15min，模拟测试3min，实际测定时于测定前5min进入套筒，适应后连续测定，取5次成功测定值的平均值为其实际血压值。 　　1.2.4　肾脏相关基因mRNA表达量的测定 　　使用TRIzol法提取肾脏组织总RNA，依照MMLV说明书进行逆转录步骤得到cDNA，并参照SYBRGreenIMasterMix说明书进行RTqPCR，检测各目的基因mRNA表达量。PCR扩增程序为：95℃预变性10min;95℃变性15s，57℃退火20s，72℃延伸30s，重复45个循环。目的基因mRNA表达量以18s为内参进行校正。 　　1.3　统计学处理 　　计量结果以珋xplusmn;s表示，采用SPSS190软件进行单因素方差分析，并进行LSD两两比较。 　　2　结果 　　2.1　海参皂苷对小鼠生长指标的影响　由Tab3可以看出，与正常组相比，模型组小鼠在饲养前后体重明显大于正常组，这也是C57BL/KsJ(db/db)小鼠的典型特征。在日平均摄入能量相近的情况下，海参皂苷低、高剂量组小鼠体重增加均受到抑制。而由Fig1可知，模型组与海参皂苷组小鼠的身体各部分脂肪重量较正常组小鼠均明显升高(Plt;001);与模型组相比，身体各部分脂肪重量海参皂苷组均明显下降，其中，海参皂苷高剂量组肾周脂肪、皮下脂肪、生殖腺周围脂肪、肠系膜脂肪的重量