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Y染色体STR基因座的异常基因类型研究 　　Y染色体上p的核苷酸，其中95%为非重组区域。该区域的遗传多态性位点构成了整个基因组范围内信息量最大、最稳定的单体型，反应男性个体间独特的遗传进化关系。在司法鉴定领域，用Y-STR可以直接确定男女混合斑中男性的Y单体型，而无需分离提取DNA，这使检测工作不仅简单而且非常有效。在Y-STR分型结果中额外基因的出现通常解释为多个体的混合物。本次研究意在探究更多的Y-STR遗传信息，为法医学鉴定提供依据。在研究中发现了11个标本的Y-STR存在异常分型结果，包括STR位点出现额外基因或基因缺失，报道如下。 　　1材料与方法 　　1.1研究对象 　　本实验室2010-2014年亲子鉴定案例。选择孩子为男性的案例，分成2组:“排除父子关系”的为1组，共49例，98个标本;“支持父子关系”的为1组，共252例，509个标本，其中有1家为3子，有3家为2子。除1家为壮族，其余均为汉族。从籍贯上分大部分为南方汉族。 　　1.2试剂与仪器 　　Chelex100(美国SIGMA，批号:SLBG4989V);AmpFlSTRYfilerTM试剂盒(美国AppliedBiosystems，批号:1405114);LIZ500(美国AppliedBiosystems，批号:1203321);PowerPlexY23system试剂盒(美国Promega公司，批号:0000144994);CC5ILS500(美国Promega公司，批号:0000130455);Hidi(美国AppliedBiosystems，批号:1209224);电泳缓冲液10хbuffer(美国AppliedBiosystems，批号:1306423);POP-4凝胶(美国AppliedBiosystems，批号:1406151)。PCR扩增仪(9700，美国GeneCompanyLimited);3130xlGeneticAnalyzer(美国AppliedBiosystems)。 　　1.3方法 　　1.3.1提取DNA采用Chelex方法，从外周抗凝血中提取DNA。 　　1.3.2PCR扩增使用AmpFlSTRYfilerTM试剂盒对Y染色体上的16个STR位点进行复合扩增，。 　　1.3.3PCR产物的电泳分析PCR产物通过ABI3130XL型测序仪电泳，毛细管长度为36cm，进样时间15s，进样电压1.5kv，PCR产物用量1.0mu;L，生成的数据文件用GeneMapperID-X软件分析(AppliedBiosystems，版本号:1.4)。 　　1.3.4重复验证分析结果中获得的异常基因型使用PowerPlexY23system试剂盒进行重复验证。 　　1.4异常基因型发生率的计算“支持父子关系”的1组以案例数计算(252例);“排除父子关系”的1组视为随机人群，以标本数计算(98个)。 　　2结果 　　2.1单体型和基因突变另文报道。 　　2.2异常基因型图谱在“支持父子关系”的1组标本中，除了单个基因的一步突变以外，有9个标本出现了异常基因型图谱。第1对父子，其DYS385基因座为三带型图谱(13，14，18)，其峰高比例约为1∶1∶2;第2对父子，其DYS385基因座为四带型图谱(13，17，18，20)，其峰高比例约为2∶1∶1∶1;第3对父子，其DYS385基因座为四带型图谱(13，18，19，21)，其峰高比例约为2∶1∶1∶1;第4对父子，其DYS439基因座为双基因图谱(12，13)，其峰高比例约为1∶1;第5对父子中儿子的DYS389Ⅱ基因座为双基因图谱(28，29)，其峰高比例约为1∶1，而其父该基因座的图谱正常，为单基因(28)。 　　2.3基因缺失的STR基因型图谱在“排除父子关系”的1组标本中有2个标本均在DYS448基因座发生了基因缺失。 　　2.4单基因座中出现多个基因和基因缺失的发生率分别为1.4%(5/350)、0.57%(2/350)。 　　2.5异常基因型的重复验证图谱。 　　3讨论 　　短串联重复序列(Shorttandemrepeat，STR)，由2-6个碱基构成核心序列，呈串联重复排列，因个体间重复次数不同而形成高度多态性。由于Y染色体在减数分裂时不与其它染色体发生重组，因此普通的Y-STR基因座呈连锁遗传，1个标本的某个基因座的分型结果只有1个基因(1条谱带)。在司法领域中，用Y-STRs确认男女混合斑中男性的DNA非常方便而有效，可以直接确定Y单体型而无需分离提取DNA。在Y-STR中额外基因的